斑馬魚胚胎的問題,透過圖書和論文來找解法和答案更準確安心。 我們找到下列問答集和資訊懶人包

斑馬魚胚胎的問題,我們搜遍了碩博士論文和台灣出版的書籍,推薦(美)M.R.格林寫的 分子克隆實驗指南(上中下)(原書第四版) 可以從中找到所需的評價。

另外網站斑马鱼实验技术服务也說明:Ø 平台繁殖和饲养有多个野生型和转基因斑马鱼品系,为各用户提供的各品系斑马鱼胚胎、幼鱼和成鱼。 斑马鱼代养服务 ...

國立臺灣海洋大學 生命科學暨生物科技學系 許濤、王志銘所指導 西莉亞的 以紫外線傷害之表現質體探討水溫上升對斑馬魚胚胎DNA切割修補作用之影響 (2021),提出斑馬魚胚胎關鍵因素是什麼,來自於熱應激、核苷酸切除修復、紫外線、斑馬魚。

而第二篇論文臺北醫學大學 奈米醫學工程研究所碩士班 陳奕平、劉滄柏所指導 朱有泰的 在斑馬魚中利用大小及電荷相關的中孔洞二氧化矽奈米粒子穿過血腦屏障 (2021),提出因為有 血腦屏障、中孔洞二氧化矽奈米粒子、斑馬魚、阿黴素、蛋白質冠冕的重點而找出了 斑馬魚胚胎的解答。

最後網站【科學儀器】斑馬魚觀察則補充:斑馬魚胚胎 在發育過程中透明易觀察,運用立體顯微鏡研究器官早期發育狀況和型態分化;再搭配轉殖螢光蛋白於肝、腸、內外分泌、心臟、肌肉、血管、血球等, ...

接下來讓我們看這些論文和書籍都說些什麼吧:

除了斑馬魚胚胎,大家也想知道這些:

分子克隆實驗指南(上中下)(原書第四版)

為了解決斑馬魚胚胎的問題,作者(美)M.R.格林 這樣論述:

分子克隆技術30多年來一直是全球生命科學領域實驗室專業技術的基礎。冷泉港實驗室出版的《分子克隆實驗指南》一書擁有的可靠性和*性,使本書成為業內流行、具影響力的實驗室操作指南。第四版的《分子克隆實驗指南》保留了之前版本中備受讚譽的細節和準確性,10個原有的核心章節經過更新,反映了標準技術的發展和創新,並介紹了一些前沿的操作步驟。同時還修訂了第三版中的核心章節,以突出現有的核酸製備和克隆、基因轉移及表達分析的策略和方法,並增加了12個新章節,專門介紹激動人心的研究策略,包括利用DNA 甲基化技術和染色質免疫沉澱的表觀遺傳學分析、RNAi、新一代測序技術,以及如何處理數據生成和分析的生物信息學,例如

介紹了分析工具的使用,如何比較基因和蛋白質的序列,鑑定多個基因的常見表達模式等。 本書還保留了必不可少的附錄:包括試劑和緩衝液、常用技術、檢測系統、一般安全原則和危險材料。任何使用分子生物學技術的基礎研究實驗室都將因擁有一冊《分子克隆實驗指南》而受益。 本書可作為學習遺傳學、分子細胞生物學、發育生物學、微生物學、神經科學和免疫學等學科的重要指導,可供生物學、醫藥衛生,以及農、林、牧、漁、檢驗檢疫等方面的科研、教學與技術人員參考。 Originally published in English as Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Fourth

Edition, by MichaelR.Green and Joseph Sambrook ? 2012 Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork, USA? 2017 Science Press. Print in China.Authorized Simplified Chinese translation of the English edition ? 2012 Cold Spring Harbor LaboratoryPress. This translation is published a

nd sold by permission of Cold Spring Harbor Laboratory Press, the owner of all rights to publish and sell the same. 《分子克隆實驗指南·上冊》目錄: 第1章DNA的分離及定量 導言 方案1SDS鹼裂解法製備質粒DNA:少量製備 方案2SDS鹼裂解法製備質粒DNA:大量製備 方案3從革蘭氏陰性菌(如E.coli)中分離DNA 方案4乙醇法沉澱DNA 方案5異丙醇法沉澱DNA 方案6用微量濃縮機進行核酸的濃縮和脫鹽 方案7丁醇抽提法濃縮核酸 方案8聚乙二醇沉澱法製

備M13噬菌體單鏈DNA 方案9M13噬菌體鋪平板 方案10M13噬菌體液體培養 方案11M13噬菌體雙鏈(複製型)DNA的製備 方案12利用有機溶劑分離純化高分子質量DNA 方案13用蛋白酶K和苯酚從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA 方案14一步法同時提取細胞或組織中的DNA、RNA和蛋白質 方案15從鼠尾或其他小樣本中製備基因組DNA 替代方案:不使用有機溶劑從鼠尾分離DNA 替代方案:一管法從鼠尾中分離DNA 方案16快速分離酵母DNA 方案17微型凝膠電泳後使用溴化乙錠(EB)估算條帶中DNA數量 方案18利用Hoechst33258通過熒光分析儀估算DNA濃度 方案19用PicoG

reen定量溶液中的DNA 信息欄 第2章DNA分析 導言 方案1瓊脂糖凝膠電泳 方案2瓊脂糖凝膠中DNA的染色檢測 方案3聚丙烯酰胺凝膠電泳 方案4聚丙烯酰胺凝膠中DNA的染色檢測 方案5聚丙烯酰胺凝膠中DNA的放射自顯影檢測 方案6鹼性瓊脂糖凝膠電泳 附加方案:鹼性瓊脂糖凝膠的放射自顯影 方案7成像:放射自顯影和感光成像 方案8用玻璃珠從瓊脂糖凝膠中回收DNA 方案9低熔點瓊脂糖凝膠中DNA的回收:有機溶劑抽提法 方案10聚丙烯酰胺凝膠中DNA片段的回收:壓碎與浸泡法 方案11Southern印跡 方案12Southcm印跡:DNA從一塊瓊脂糖凝膠同時向兩張膜轉移 方案13採用放射性標記探

針對固定在膜上的核酸DNA進行Southern雜交 附加方案:從膜上洗脫探針 信息欄 第3章質粒載體克隆與轉化 導言 方案1製備和轉化感受態大腸桿菌的Hanahan方法:高效轉化策略 方案2製備和轉化感受態大腸桿菌的Inoue方法:“超級感受態”細胞 方案3大腸桿菌的簡單轉化:納米顆粒介導的轉化 替代方案:一步法製備感受態大腸桿菌:在同一溶液中轉化和儲存細菌細胞 方案4電穿孔法轉化大腸桿菌 方案5質粒載體克隆:定向克隆 方案6質粒載體克隆:平末端克隆 方案7質粒DNA的去磷酸化 方案8向平末端DNA添加磷酸化銜接子/接頭 方案9克隆PCR產物:向擴增DNA的末端添加限制性酶切位點 方案10克隆

PCR產物:平末端克隆 方案11克隆PCR產物:製備T載體 方案12克隆PCR產物:TA克隆 方案13克隆PCR產物:TOPOTA克隆 方案14使用X—Gal和IPTG篩選細菌菌落:α—互補 信息欄 第4章Gateway重組克隆 導言 方案1擴增Gateway載體 方案2製備可讀框入門克隆和目的克隆 方案3應用多位點LR克隆反應製備目的克隆 信息欄 第5章細菌人工染色體及其他高容量載體的應用 導言 方案1BAC DNA的小量分離和PCR檢驗 方案2BAC DNA的大量製備和線性化 方案3通過脈衝電場凝膠電泳檢驗BAC DNA的質量和數量 方案4兩步BAC工程:穿梭載體DNA的製各 方案5A同源

臂(A—Box)和B同源臂(B—Box)的製備 方案6克隆A和B同源臂到穿梭載體 方案7重組穿梭載體的製備和檢驗 方案8通過電穿孔法轉化重組穿梭載體到感受態BAC宿主細胞 方案9共合體的檢驗和重組BAC克隆的篩選 方案10一步BAC修飾:質粒製備 方案11A同源臂(A—Box)的製備 方案12克隆A同源臂到報導穿梭載體 方案13用RecA載體轉化BAC宿主 方案14轉移報導載體到BAC/RecA細胞以及共合體的篩選 方案15釀酒酵母(S.cerevisiae)的生長和DNA製備 方案16酵母DNA的小量製備 信息欄 第6章真核細胞RNA的提取、純化和分析 導言 方案1從哺乳動物的細胞和組織中提

取總RNA 替代方案從小量樣本提取RNA 方案2從斑馬魚胚胎和成體中提取總RNA 方案3從黑腹果蠅提取總RNA 方案4從秀麗隱桿線蟲中提取總RNA 方案5從釀酒酵母菌中採用熱酸酚提取總RNA 方案6RNA定量和儲存 方案7RNA的乙醇沉澱 方案8通過無RNase的DNaseI處理去除RNA樣品中的DNA污染 方案9Oligo(dT)磁珠法提取poly(A)+mRNA 方案10按照大小分離RNA:含甲醛的瓊脂糖凝膠電泳 方案11根據分子質量大小分離RNA:RNA的尿素變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 方案12瓊脂糖凝膠中變性RNA的轉膜和固定 替代方案下行毛細管轉移 方案13聚丙烯酰胺凝膠的電轉移和膜固定

方案14Northern雜交 方案15純化RNA的點雜交和狹縫雜交 方案16用核酸酶S1對RNA作圖 方案17核糖核酸酶保護分析:用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針對RNA作圖 方案18引物延伸法分析RNA 信息欄 第7章聚合酶鏈反應 導言 方案1基礎PCR 方案2熱啟動PCR 方案3降落PCR 方案4高GC含量模板的PCR擴增 方案5長片段高保真PCR(LAPCR) 方案6反向PCR 方案7巢式PCR 方案8mRNA反轉錄產物cDNA的擴增:兩步法RT—PCR 方案9由mRNA的5’端進行序列的快速擴增:5’—RACE 方案10由mRNA的3’端進行序列的快速擴增:3’—RACE 方案1

1使用PCR篩選克隆 信息欄 第8章生物信息學 導言 方案1使用UCSC基因組瀏覽器將基因組註釋可視化 方案2使用BLAST和ClustaIW進行序列比對和同源性檢索 方案3使用Primer3Plus設計PCR引物 方案4使用微陣列和RNA—seq進行表達序列譜分析 方案5將上億短讀段定位至參考基因組上 方案6識別ChIP—seq數據集中富集的區域(尋峰) 方案7發現順式調控基序 信息欄 …… 《分子克隆實驗指南·中冊》 《分子克隆實驗指南·下冊》

斑馬魚胚胎進入發燒排行的影片

#護膚品QnA #美麗有毒 #敏感皮膚保養 #濕疹 #有效美白 #抗皺
Janeclare前兩天維修網頁, 現在條link是這裏 www.janeclare.com
各位親愛的網友(遊戲答案要先看12分鐘10:00pm影片找到)
以下問題, 將於星期六晚上?10:30pm
百萬富翁遊戲, 10pm會有一條12分鐘嘅影片播放 , 之後會出直播, 問以下十五條問題, 送出15份禮品, 每份禮品超過$1500,以下問題, 直播節目中, 祝大家好運。
????....???(男網友都可以送俾朋友)



到時JaneClare員工 , 望住邊個網友答得最快為之勝出 , 在節目中, 會事先聲明 , 由於每一個網友地區上網速度不一樣, 答案誰是最先勝出 , 由JaneClare工作人員手機見到?個啱嘅為基準。 如有任何爭議,JaneClare保留最終決定權。每人只係可以答一次, 每位幸運兒每晚只可以得一次獎品,總共有2個星期。

#giveaways #janeclare #youtube #smarttravel #smartravel阿sa #youtube送大禮
15 Questions:

1 JaneClare嘅產品, 因為係絕對天然, 是否適合兒童選用,
答案 :

2 JaneClare喺youtube頻道smart travel , 招聘一個?職位
答案:

3 JaneClare護膚品牌注重純天然, 利用中西方草藥取代曬所有有害加化學防腐劑與及有害物質,試講出以下邊一樣有害防腐劑, 經常會喺其他嘅護膚品導致致敏成份

答案:

4.試講出JaneClare採用純種德國斑馬魚胚胎測試美白嘅效果效果能夠達到a grade嘅幾多個%, (其他大部分嘅A grade護膚品只係能夠達致30%)
答案:

5. 美國環保組織EWG曾經做過測試, 透過每天的日常日用品或護膚品, 最快?秒化學物質可以從皮膚進入血管, 繼而長期使用會影響我哋嘅健康生活例如有乳癌的風險啦 、男女性不孕呀 、少女早熟啦 等等嘅問題
答案:


6. JaneClare 主席Chairman Angela除咗係創辦人之外 ,佢另外一個職業係乜嘢呢 ?
答案 :



7. 用咗有害的化學物質嘅護膚品,對你皮膚的刺激,最常見的現象皮膚會出現啲乜嘢症狀
答案:

8. JaneClare所有產品採用有機中草藥和西方草本植物作為原材料,天然保質期?年
答案


Hello大家好我叫阿Tsar, 今日想同大家研究幾個護膚品Q & A

今時今日護膚已經不只是女人專利 ,我身邊識好多男性朋友都有護膚

但究竟你們又對護膚品有幾多認識呢?

今日我就來到這一間位於新蒲崗擁有國際GMP標準

無塵無菌的廠房和實驗室參觀一下

你們看到這裹JanClare GMP廠房正壓生產房間、

光觸媒(Photocatalyst)殺菌、雙重消毒、不藏塵的無縫地板

“GMP”英文Good Manufacturing Practice的縮寫,

中文的意思是“良好作業規範”,或“優良製造標準”,

是一種特別註重製造過程中的產品質量與衛生安全的自主性管理制度。

它是一套適用於製藥、食品等行業的強制性標準,

並且要求企業從原料、人員、設施設備、生產過程、包裝運輸、

質量控制等方面按國家有關法規達到衛生質量要求。

你們日後去購物的時候,如果在藥物或食品方面有這個GMP認證,

信心自然會高好多啦
  
我很榮幸跟一間極高國際標準的護膚品牌JaneClare

Chairman Angela和她的Director Gary Choi會面

網友看完這一集,就會對購買護膚品有更加深入的認識

不要以為出名的護膚品才叫最好呀

以下是JaneClare Director Gary Choi

會跟大家講解一下 ,無論膚品的平或貴

大家最緊要認識幾個,對皮膚最有害的護膚品成分

當中亦有些好貴好出名的牌子

Gary 不會披露這些牌子名字,

但國際其實有很多類似我們香港消委會的研究報告

已經曾經提過這些牌子裏面的有害化學成分

一般護膚品裏面有什麼致敏成份呢 ?

為何會放甲醛呢? 甲醛是相當有害的物質

又究竟你們知否自已買了什麼護膚品搽在面上 ?

聽聽Gary怎樣解說:

2017年出的,報館找了很多歐美、日韓的護膚品牌

你見到這些,我不方便講品牌名字

歐美日韓最top的品牌都在這裏

測試出來是什麼情況呢?他們測試BB cream四成都不合格

如果你近看這些魚杯胎全部死掉,

因為你會了解這些護膚品裏面含有類似激素

以及化學防腐劑,在影響魚的柸胎

就是過不到生物毒性測試,那有什麼為害呢

乳癌、子宮癌、孕婦更會影響生出畸形胎兒機會

孕婦絕不能用,男人女人兒童也不應該用

但這裏產品在國內每年銷量超過20億

政府消費者委員會包括消費月刊不斷提醒市民

提醒要看成份,例如這一期的選擇月刊

提醒要看隱藏多種致敏成份

美國報告出了20%護膚品含有化學防腐劑成分甲醛

為何在裏面呢。並非污染,是特意放在裏面

他們放一些叫做甲醛釋放劑,靠釋放甲醛去殺菌

這個並非普通品牌,可能好多人都見過

是全球最暢銷的護膚品牌,

消委會已經公布了是什麼品牌,大家可以上網搜索

裏面就正正用這個甲醛來做防腐,

消委會亦提到另一個品牌,全球暢銷第三品牌

N字頭,它用另一個防腐劑叫MIT簡稱

這種防腐劑已經被歐盟禁用

因為在歐洲導致一個叫濕疹疫症

但這類防腐劑在香港產品當中

都經常還發現存在,另外有一個報道

我們經常說男孩女孩很早熟

為何八歲女學生已經有月經,為何呢?

原來是用了一些含有類雌激素的潤膚露

即是搽在皮膚上的含雌激素的成份包括化學防腐劑

會令到兒童早熟,這個是訪問

為何這樣呢?因為美國環保組織EWG已經講過

其實透過我們每天的日常日用品或護膚品

即是男孩和女孩每天接觸那麼多過百種的不同化學物質

這些化學物質最恐怖是什麼呢?

最快26秒化學物質可以從皮膚進入血管

還影響我們身體,為什麼剛才說女孩容易早熟呢

其實用的護膚品當中,就會入到皮膚

八歲可能不用護膚品,但包括個人護理用品例如

用潤膚露也會中招,皮膚當然會中招啦

這各種的問題,令皮膚過早老化。

我們叫這些做化學中毒。

你們可想而知 ,如果你不認識一個品牌究竟放什麼在護膚品的成分

根據美國環保組織Environmental Working Group列出的4000多種有害化學物質。

你怎能夠單憑幾句動聽的廣告字句,

就去選購那個牌子用呢?

既然出面有好多含有化學防腐劑的護膚產品

今日我就介紹給大家JaneClare這間信譽可靠護膚品牌給大家

因為 JaneClare所有產品不添加任何化學防腐劑

珍卡兒於2015年及2016年分別榮獲MediaZone

所頒發『香港最可信賴的護膚品牌』及『香港最有價值的香港公司』獎項。

該公司更組合多種從中草藥提取的天然抗菌成分,

以達到防腐效果,令其產品未開封前的保質期可長達3年。

我們聽聽我朋友王子 跟Chairman Angela的對話

好舒服嗎?但是我在想,你未上來之前

皮膚比較敏感,你是否還未遇到一隻適合你 的護膚品呢?

都是啊!因為我平時都有用不同的護膚品,經常會一點點紅

有時甚至泛紅滿面,有什麼辦法可以處理呢?

看你這麼美男子,但是有很多護膚品

它越天然就越要防腐,它防腐就需要很多化學物質

這些有害的化學物質,對你皮膚的刺激是很大

你為何會面上泛紅呢?你皮膚、身體裏面的免疫系統

因為它感覺到外來的侵襲,它就要去抗拒侵襲

所以血液就沖擁着被侵襲的血管部份

這是經常都會見到的情況

皮膚敏感是常見的現象,這也是我們產品的優勢

我們的產品就是沒有一點化學防腐、有害物質都不會用

我說的有害化學物質,就是在美國有一個組織叫EWG

這個組織,它列出了4000多個有害的化學物質

但這些有害的化學物質是普遍存在於化妝品和護膚品裏面

因為這些有害的化學物質都能夠令到這些產品

在質感上、味道香味、吸收等等,都會提升

所以他們為了某種目的,所以就一定要加這些有害的化學物質

但是我們就是用了10幾年的研發、很多專家的投入

完全用中草藥代替了所有這些有害化學物質

用好的中草藥和西方的草本,去代替這些有害的化學物質

所以用落去的感覺是完全不同的,亦不會刺激到身體免疫力

好多護膚品公司 ,都有其自己的產品測試

從而看到那隻護膚品會否對皮膚有傷害性存在

由測試中可以知道和證實那個成份對護膚品的有效程度

JaneClare就用到一種叫做純種德國斑馬魚來做美白測試

至於測試的詳情是怎樣呢, 聽聽Gary的解説吧

魚的杯胎,有七成跟人類的DNA相似

所以廣泛被利用,測試產品的功效和安全

這個榜單就有我們的產品,這裏我們就拿到一個卓越品質

即是最安全的一個規格,不單止是這樣

我們在一個美白測試裏面,是用一個達到最高評級

怎樣叫最高評級呢,像考試一樣有A B C D

A grade的最高評級,它要能夠抑制到30%的黑色素

你看這條魚,黑萌萌的,沒有很好的抑制黑色素美白產品

魚的杯胎就慢慢會生好多黑色素出來

A grade的產品你留意到呢,白了很多

換言之,能夠抑制黑色素三成就是這樣

但是我們產品測試抑制黑色素是怎樣呢

魚的杯胎這些位置你看得出分別

兩者比較,特別在條魚尾,這些位置都是

我們不單止可以去到A grade,

我們差不多可以去到A grade的Double

可以抑制黑色素去到59%,

大家用JaneClare 的產品,就可以少了多方面的顧慮

因為它們融入了中醫理念,

採用有機中草藥和西方草本植物作為原材料,

天然保質期三年,不含化學防腐劑及任何有害化學成份

其中多項產品均採用和參考了經典古漢方,

例如王牌之一的再生修護乳霜(Reborn Power Cream)

古籍記載此配方令楊貴妃擁有白裏透紅的「傾城之色」。

JC將此宮廷秘方優化,再配合獨家的天然皮膚滲透技術,

獲取國際認可機構臨床證實連續使用四星期可擊退78%皺紋。
......................你現在見到我這個WhatsApp是我跟他們高層的對話

老闆娘勞太確是認真look for一個代言人㗎

但要什麼條件呢,就要你們收看到第三集啦

我在這裏賣個關子先,ok?

你們可以開始寄出你們的CV去這條影片的留言之頂,

聯絡「應徵代言人」的Email,

貼士要繼續留意下兩個星期六的影片YouTube頻道Smart Travel

這條影片播出之後,緊接就是直播送禮品環節

JaneClare 將會送出SD或JC系列的產品

其中一個體驗療程給15位幸運兒

每一位得獎者都可以享用這些產品其中一個系列的體驗療程

每位價值$1380, 另外做完療程之後

美容師會送出SD或JC產品其中一樣給各位幸運兒

美容師會因應幸運兒的皮膚而去送出那個產品

另外由今日節目1月9號至到2月9號2021年

一個月之內任何人士在JaneClare網頁,

購物滿$500,在備注欄輸入優惠碼Smart Travel

更可以收到一份價值$180的黃芪原液一支

你除開條數,其實是一個好大的優惠來的

稍後15分鐘,我會進行1小時直播

將15份禮物送給大家,

希望大家踴躍參與,預祝各位好運。轉頭見。

?合作邀約請洽
[email protected]
https://www.instagram.com/gold7778t/

成為這個頻道的會員並獲得獎勵:
https://www.youtube.com/channel/UCIuNPxqDGG08p3EqCwY0XIg/join

請用片右下角調4K睇片。

以紫外線傷害之表現質體探討水溫上升對斑馬魚胚胎DNA切割修補作用之影響

為了解決斑馬魚胚胎的問題,作者西莉亞 這樣論述:

由於核電站排放的加熱污水或海洋變暖,海水溫度可能會升高。在接收排放的海洋區域,發現溫度升高了 8 至 12 攝氏度,高於環境溫度。核苷酸切除修復 (NER) 通過去除螺旋扭曲的 DNA 損傷來保護遺傳材料的完整性。本研究旨在探討斑馬魚胚胎中 NER 對水溫升高的閾值敏感性。將受精後 10 小時 (hpf) 的早期胚胎和在 28.5 ˚C 飼養的 24 hpf 的中早期胚胎迅速轉移到預熱至 37、33 或 31 ˚C 的水中 30 分鐘,並通過帶移測定法測定 NER 活性和體外 DNA 修復試驗。紫外線誘導形成兩種類型的螺旋扭曲損傷,稱為環丁烷嘧啶二聚體 (CPD) 和 (6-4) 光產物 (

6-4PP)。帶移測定顯示在 10 hpf 胚胎中受到 +8.5 ˚C 熱應激的刺激 6-4 PP 結合活動,但這些活動在壓力 24 hpf 胚胎中受到抑制。熱應激對 CPD 檢測活動產生了類似的影響。在經歷 + 4.5 ˚C 弱熱應激 (WHS) 的胚胎中也觀察到 6-4 PP 和 CPD 結合活性的增強。相比之下,紫外線損傷的 DNA 結合活性在 WHS 下的中早期胚胎中受到抑制。 CPD 和 6-4PP 傳感活動在早期和中期早期胚胎中在 + 2.5 ˚C 溫和熱應激 (MHS) 中均受到抑制,並且抑制紫外線損傷的 DNA 結合活動與抑制整體 NER 相關通過基於轉錄的修復測定確定的容量,

揭示了斑馬魚胚胎中 NER 機制對 MHS 的易感性,無論發育階段如何。因此,當水溫升至 2.5 ˚C 時,魚胚胎也無法保持其遺傳完整性。

在斑馬魚中利用大小及電荷相關的中孔洞二氧化矽奈米粒子穿過血腦屏障

為了解決斑馬魚胚胎的問題,作者朱有泰 這樣論述:

中文摘要背景血腦屏障(Blood-Brain Barrier, BBB)是一種高度選擇性的細胞屏障,它嚴格控制中樞神經系統的微環境以限制物質通過,這是提供治療性藥物治療腦部疾病的主要挑戰。本研究旨在開發無需外部刺激或受體蛋白綴合的中孔洞二氧化矽奈米粒子 (MSNs) 的簡單表面修飾,使其表現出臨界表面電荷和尺寸,允許它們在大腦中穿過BBB。方法氨催化的溶膠-凝膠工藝用於合成 MSNs,並進一步進行聚乙二醇化。通過使用穿透式電子顯微鏡 (TEM)、動態光散射儀 (DLS)和介面電位量測儀(Zeta potential Analyzer)對MSNs進行物理表徵驗證。通過使用流式細胞術進行細胞吞噬

。在斑馬魚中研究了跨BBB的阿黴素 (Dox)的藥物遞送和釋放。通過LC/MS質譜分析的蛋白質冠冕用於驗證MSNs的蛋白質吸附對BBB 滲透的影響。結果合成了8種具有正負電荷和兩種不同尺50和200 nm的MSNs。各種類型的MSNs的表徵顯示出均勻的中孔結構,具有從+ 42.3到- 51.6 mV的各種表面電位。共軛焦顯微鏡量化結果表明,與其他帶負電荷的MSNs (N2、N3 和 N5-RMSN50@PEG/THPMP)相比,在斑馬魚胚胎的腦血管外可以顯著觀察到N4-RMSN50@PEG/THPMP。然而,在大腦中幾乎沒有發現帶正電荷的MSNs (P1 和 P4-RMSN50@PEG/T

MAC),這表明帶負電荷的 MSNs可以成功地穿透 BBB。此外,當尺寸增加到 200 nm 但保持與50 nm N4-RMSN50@PEG/THPMP相似的表面負電荷,在斑馬魚的大腦中未發現N4-RMSN200 @PEG/THPMP。這些結果表明,基於MSNs的BBB傳輸是以電荷和大小相關的方式進行的。阿黴素 (Dox)加載N4-RMSN50@PEG/THPMP後,裝載量為5.57± 0.22 wt. %,裝載效率為78.13±3.07 %。毒性試驗表明奈米粒子可以降低Dox的藥物釋放,從而提高斑馬魚的存活率。此外,通過載有Dox的N4-MSN50@PEG/THPMP在斑馬魚中實現了Dox

在大腦中的藥物輸送和藥物釋放。流式細胞儀顯示N4-RMSN50@PEG/THPMP幾乎沒有細胞吞噬。蛋白質冠冕分析評估了轉運蛋白 (如Afamin和載脂蛋白E)對BBB滲透的作用,驗證了N4-RMSN50@PEG/THPMP可以穿過BBB。結論通過這種簡單的方法,我們證明了具有臨界負電荷和大小的MSNs可以克服治療藥物分子的BBB限制特性;此外,它們的使用還可以減緩藥物在大腦中的釋放,降低大腦外周毒性。關鍵詞血腦屏障 (BBB)、中孔洞二氧化矽奈米粒子 (MSNs)、斑馬魚、阿黴素 (Dox)、蛋白質冠冕。