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巴拉圭家飼動物外侵襲病媒蜱之蜱媒介病原體的分子檢測

為了解決eppendorf中文的問題，作者Cristell Janette Duarte Cheretti 這樣論述：

研究背景: 雖然已有許多研究報導有關南美洲國家之蜱媒介疾病，然而卻僅有極少數研究有關巴拉圭之蜱種分佈及病原體傳播。因而本研究將有貢獻於巴拉圭及南美洲之科學、醫學及獸醫界。研究目的: 我們的目的將運用蜱種形態特徵，以確認採集自巴拉圭四個省份之家飼動物外侵襲蜱種株，同時並使用巢式聚合酶鏈反應及定序分析技術，以檢測蜱隻感染立克次體菌狀況及確認其基因種。研究方法: 所有採集自家飼動物之蜱隻於2011年5至8月期間完成，並使用蜱隻移除鑷子自動物摘離後置於標示密封袋內於冰箱內保存，直至運抵實驗室後置入含75%酒精之離心管內，並使用立體解剖顯微鏡以鑑定其蜱屬及種株。每隻蜱隻於萃取核酸(DNA)前皆經超音波

震盪清洗，並針對邊蟲之16S rRNA基因進行巢式聚合酶鏈反應之檢測，檢測得之陽性樣本再續以基因定序處理。研究結果: 所有蜱隻採集自犬、貓、牛、馬及羊等31個宿主動物，共計採得來自巴拉圭四個省份之333蜱隻，蜱種鑑定顯示其中包含54.6%之微小牛蜱(Rhipicephalus microplus)、27.6%之褐黃狗蜱(Rhipicephalus sanguineus)、 14.1%之革蜱(Dermacentor nitens) 及 3.6%之五種花蜱(Amblyomma spp.)。而針對邊蟲16S rRNA基因進行邊蟲感染之分子檢測，則顯示採得蜱隻分別具有6.6% (22/333)及21.

3% (71/333) 之A. marginale 及A.centrale的陽性率，而陽性樣本之定序結果亦顯示與GenBank資料庫已知之A. marginale and A. centrale具有100%基因序列相似度。討論: 本研究顯示扇頭蜱屬(Rhipicephalus spp.)乃巴拉圭多數區域家飼動物之主要寄生蜱種，由於採集得花蜱數量較少，故而無法於本研究確認其實際盛行狀況。本研究結果證實A. marginale 及A. centrale兩種邊蟲存在於巴拉圭蜱隻，並分別具有6.6% 及21.3%之感染率。本結果亦建議有關蜱媒介邊蟲病之漠視及誤診，此狀況促使邊蟲感染成為巴拉圭公衛上被忽

略之重要動物疾病，並威脅人類健康。

分子選殖及定量分析台灣水果的泛過敏原

為了解決eppendorf中文的問題，作者謝秉辰 這樣論述：

泛過敏原 (Pan-allergen)具有高度保守序列和三維結構，會使不相關食物來源的過敏原產生IgE的交叉反應，導致過敏的病人產生嚴重的臨床症狀。Profilin、Lipid transfer proteins (LTP)和Pathogenesis-related protein 10 (PR-10)是植物來源食物中最重要的三種泛過敏原。檢測植物性食物裡泛過敏原濃度可以提供過敏病人正確的飲食建議，而台灣經常食用的植物來源食物之三種泛過敏原的濃度尚不清楚。本研究目的為量化台灣本地水果粗萃物裡三種泛過敏原。實驗方法首先由番茄的幼芽萃取mRNA，經由反轉錄聚合酶連鎖反應(RT-PCR)，產生pr

ofilin (rSola l 1)、nsLTP (rSola l 3)和 PR-10 (rSola l 4) 的cDNA。其次接合到pQE30載體並轉型在大腸桿菌的表現系統，最後進行表現及大量純化三種重組蛋白質。此外，我們製備18種本土或進口的水果粗萃物，並利用自製之免子anti-rSola l 1、3、4多株抗體，以immuno-dotted blotting方法分析三種泛過敏原的含量。實驗結果首先以純化的重組蛋白質rSola l 1、3、4進行ELISA，分析120位水果過敏的病人血清IgE反應，陽性率分別為rSola l 1, 13%；rSola l 3, 32%; rSola l 4

, 13%。其次18種粗萃物泛過敏原定量結果顯示水蜜桃和芒果含有最高含量的profilin、nsLTP和PR-10；木瓜、香瓜和番茄也具有低含量的三種泛過敏原；而胡蘿蔔只有檢測到LTP的含量。本檢測最低靈敏濃度為0.65 μg/ml，結果顯示immuno-dotted blotting法足以檢測出植物性食物之低含量的泛過敏原。總結我們初步數據顯示，最常發生交叉反應的水果為水蜜桃和芒果，和西方文獻所描述的結果一致。我們成功建立了快速檢測食物泛過敏原的方法。