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味丹味精進入發燒排行的影片

麩胺酸脫羧酶酵素活性分析與工業生產胺基丁酸

為了解決味丹味精的問題，作者張文翰 這樣論述：

Glutamate Decarboxylase 3 ( GAD 3 ) 可以將L - Glutamate上的羧基去除，形成GABA。它的受質以及產物皆是人體的神經傳導物質L - Glutamate ，以及神經傳導抑制劑GABA ( γ-胺基丁酸，γ-aminobutyric acid )。L - Glutamate主要為調控神經元突觸的神經衝動訊息傳導，而相對的GABA則會抑制這個衝動。人體若缺乏了GAD則會無法正常產生GABA來抑制神經衝動，而產生過度緊張、癲癬症、躁鬱症、狂躁症、失眠、末端顫抖或甚至帕金森氏症以及老年癡呆症，由此可知GAD扮演的重要角色。而除了神經衝動的抑制外，將成為蛋白

質體學時代醫療體系上，不可或缺的一角。本實驗主要分析出GAD 3的酵素特性，其中酸鹼環境、離子需求、受質抑制、產物抑制甚至探討到GAD 3對於其他胺基酸受質的催化性與對於味精催化性，在酵素結構分析以及活性區分析很有幫助，積極推動GABA在發酵槽大量製造，希望能為精神患者有所幫助。利用已經選殖好GAD 3 菌種，也再將其plasmid DNA進行Error prone PCR後再次進行基因選殖。然而將突變GAD 3經由小量表現得到的粗酵素進行TNB法表現量篩選，經由篩選後得到活性上差異的菌種進行序列分析及比對，得出L 1 、L 24、H 20、H 38、H 1、H 26、H 39、H 46等菌種

，序列轉成胺基酸後 L 1 及L 24為相同突變位 ( D 296 A )，H 20突變位有兩點 ( G 297 A and S 491 P )，H 38只有一個突變位 ( G 297 A ) ，H 1突變位有兩點( V 78 A and F 271 S )，H 26只有一個突變位 ( F 271 S ) ， H 39突變位有5點 ( R 50 L , V 78 A , F 271 S , I 375 V and G 515 V )，而H 46突變位有6點 ( T 16 S , V 78 A , D 128 G , F 271 S , S 471 T and W 423 L )。然而D 2

96 A及S 491 P的突變位符合前人所推估及比較的Active site。GAD 3及其他突變株GAD 3的酵素分子量皆為約56kDa。酵母菌Yarrowia lipolytica的GAD 3基因轉殖株，在誘導期間GAD 3基因轉殖株，酵素的活性持續分泌到培養液，到108 hrs酵素分泌至細胞外達穩定高峰，目前在正積極的與味丹公司方面合作，在小量1.2 L發酵上加入20 μM Pyridoxal phosphate及20 μM Ferrous fumarate等輔酶在利用HPLC的分析，已精確計算出5 mM MSG消失比率在24 H時為61%，而在麩胺酸轉化生合成GABA上的轉換率在24

H時高達85%。而為了要工業化生產GABA使用5 L小型發酵槽前的評估與測試，經由不斷改良後利用HPLC的分析轉換率為100 %、固型物為1.42%，而1000 L的監控條件 pH：5.4~5.3、Glucose：0.05~0.018 ( % )，近期和味丹公司可產製出10 Kg GABA，可進入保健食品的動物及人體試驗。