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中藥成分之定性與定量分析--訶子、黃柏、黃芩及微量元素

為了解決主成分分析spss的問題，作者莊麗貞 這樣論述：

高效液相層析(HPLC)及毛細管電泳(CE)同屬液相分離技術，它們遵循不同的分離機制，各有其優缺點，可適用於多種類型的化合物分析，是目前最常用於定量中藥材指標成分的分析方法。本研究利用此兩分析方法分析訶子、黃柏以及黃芩藥材，整理歸納，以建立化學指紋圖譜辨識基原的方法；應用感應耦合電漿質譜儀(ICP-MS)分析防己、丹皮、厚朴之微量元素含量，以探討其比值與品種之間的關係。另外，以多變項統計分析，驗證前項辨別法則；以藥物動力學，探討不同組合三黃瀉心湯製劑中黃芩成分的生體轉化及可用率。 訶子為著名治喉痛中藥，常用作收斂劑，其主要藥效成分為多種水解型單寧。本研究以開發磷酸與氰甲烷

為沖提液的高效液相層析方法，可在八十分鐘內成功分析十四個單寧指標成分；以硼酸鈉、磷酸鹽及界面活性劑配製緩衝溶液，利用MEKC毛細管電泳模式，可在四十分鐘內得到近似的分析結果。總體而言，HPLC條件在分離極性較高的小分子單寧效果較佳；CE條件則對中性溶液中能解離的化合物較理想。應用高效能液相層析法分析臺灣的市售訶子藥材，計收集長圓形的訶子(Terminalia chebula Retz.)22件及卵圓形的小花訶子(T. chebula Retz. var. parviflora Thwaites) 6件。實驗結果顯示，成分1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-b-D-glucose

與punicalagin的含量比值可用於分辨該兩品種；chebulinic acid、chebulagic acid及1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-b-D-glucose三成分含量可用於評鑑訶子品質；而chebulagic acid與1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-b-D-glucose的比值，則可同時用於品種辨別及品質評價。 以毛細管區帶電泳(CZE)定量黃柏的五個生物鹼，分析市售黃柏樣品28批，發現大都來自禿葉黃皮樹(Phellodendron chinense var glabrius-culum Schneid.)，與199

3年的調查結果不同，本文綜合所有資料，建立臺灣黃柏(P. wilsonii Hayata et Kanehira)、日本黃柏(P. amurense Rupr. var. sachalinense Fr. Schm.)、關黃柏(P. amurense Rupr.)、川黃柏(P. chinense Schneid.)及禿葉黃皮樹等五品種的辨識方式。市售黃芩經組織鏡檢，共有黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)、粘毛黃芩(S. viscidula Bge.)、西南黃芩(S. amoena C.H. Wright)、連翹葉黃芩(S. hypericifolia Levl

.)等四品種；本研究綜合32批黃芩樣品的六個黃酮成分分析資料，發現粘毛黃芩的oroxylin A 7-O-glucuronide含量最高為主要分辨點；家種黃芩成分與黃芩相當接近，但是baicalein 7-O-glucuronide含量較多；西南黃芩與連翹葉黃芩則明顯含有兩未知吸收峰，可有效作為辨別依據，經LC-MS檢測與文獻查考，推斷該等成分結構為5,7,2‘-trihydroxy-6- methoxy-flavone及其glucuronide。 川丹皮與西丹皮，廣防己、粉防己與日防己，川厚朴、凹葉厚朴及混淆品武當玉蘭等三類藥材共八品種，可用其藥效或特殊成分的有無或比值，

明確分辨。我們用ICP-MS測定各不同品種間的水溶性微量元素含量比例，發現植物因彼此蓄積效果不同，各藥材間與各品種間確實存在不同含量的特徵元素。以十四個稀土元素(La~Lu)及Li, Be, Al, Ga, Ge, Sr, Mo, Ag, Cd, Cs, Ba, Tl等特徵元素，可分辨川丹皮與西丹皮；以稀土元素及Mn、Rb、Sr等特徵元素，可鑑別廣防己、粉防己與日防己。但同樣方法用於川厚朴、凹葉厚朴及混淆品的分辨，其效果則不盡理想。 多變項統計分析是生物資訊的重要工具之一，適用於多樣品多變數的辨識應用。我們利用群聚分析對化學成分的含量變異做解析，可協助人工比對，客觀而高效率

的檢視以往的藥材分類成果；應用主成分分析，由丹皮的68個無機元素中篩選出16個特徵元素，可有效降低變數數目；另外，經由區別分析瞭解變數的特徵性，建立黃芩五品種的區別函數，其中以正品及家種黃芩的效果最好，分辨效率將近100 %；試驗結果也發現，少數關鍵性成分含量或其比值的加入，可有效幫助厚朴的基原辨識。 不同萃取方法的三黃浸膏在動物體內的吸收代謝有明顯差異。本研究以共煎、50%乙醇萃取、混合等三種三黃浸膏樣品作比較，發現餵食共煎三黃浸膏之大鼠，血清中的藥效成分濃度最高(Cmax of BG = 6.03 mg/mL, Cmax of WG = 4.38 mg/mL)，相對生體

可用率最好(共煎的Frel為50%乙醇萃的三倍，為混合製劑的五倍)，且濃度時間曲線為單峰形式(Tmax =3小時)。50%乙醇萃取與共煎較類似；混合樣品則使排尿量明顯增多，尿藥回收率(WG=1.1%, B=3.2%)明顯高於共煎者(WG=0.3%, B=1.5%)，而且各成分的血藥濃度時間曲線呈雙峰現象(Tmax =1和12小時)，生體轉化機制與共煎顯著不同，推測可能是大黃的rhein或chrysphanol與黃芩藥效成分發生拮抗作用所致。本實驗數據顯示，方劑適當配伍有其意義與重要性。