rt-pcr檢驗的問題，透過圖書和論文來找解法和答案更準確安心。 我們找到下列問答集和資訊懶人包

食品微生物檢驗技術

為了解決rt-pcr檢驗的問題，作者蔡文城,蔡岳廷 這樣論述：

本書特色 　　1. 除了有系統地介紹衛福部食藥署公告的食品微生物一般檢驗、衛生指標菌及致病菌的檢驗技術外，亦介紹乳酸菌及保健食品、耐酸/耐熱腐敗菌的檢驗技術。 　　2. 除了介紹食品微生物的傳統檢驗技術外，亦介紹分子診斷技術及避免污染與操作品管的方法、直接從食品快速偵測病原菌的新設計、以及各種新上市的檢驗儀器和設備。 　　3. 提供衛福部食藥署公告的食品微生物檢驗流程示意圖，讀者將可藉由流程圖快速認識及瞭解檢驗方法的精髓，並將公告的每一檢驗流程內容加以解讀，讀者將可瞭解檢驗步驟的背後原理、目的或根據、檢驗過程中需注意的事項、結果的計算與報告提出的正確格式。 　　4. 說明新公告的「

腸桿菌科」檢驗方法與「大腸桿菌群」或「大腸桿菌」的檢測範圍不同，並對公告的採樣計畫及限量標準進一步利用ICMSF的採樣分類及依據加以補充，以便讓從業者更能清楚認識新公告方法的意義和重要性。 　　5. 比較衛福部公告的食品微生物檢驗方法及中國大陸國標方法，讓讀者瞭解海峽兩岸方法的異同以及不同方法的優缺點，進一步作為評估本身檢驗室當前方法的合適性。 　　6. 強調「從農場到餐桌」需注意的良好衛生規範、危害分析重要管制點以及風險分析，並且深入淺出介紹風險評估、風險管理及風險溝通的觀念，以及在臺灣推動食品安全的做法。 　　7. 推薦輔助傳統生化鑑定的替代方法包括：顯色瓊脂培養基、應用生化八管的電

腦密碼鑑定系統、快速鑑定套組、自動化鑑定系統及MALDI-TOF MS，這些方法的正確選擇更可加強檢驗人員對鑑定結果的信心。 　　8. 闡述飲料或罐頭食品中之一般腐敗菌及耐酸/耐熱菌的特性，將有助於食品業者瞭解運銷及貯存過程中避免暴露在高溫環境中的重要性。 　　9. 在每一致病菌章節的前言介紹該致病菌的流行病學以及所引起的感染，而在一般檢驗及衛生指標菌章節特別介紹執行該檢驗的意義，此有助於檢驗人員瞭解檢驗操作背後的緣由。 　　10. 本書提供產毒黴菌的檢驗室檢驗流程和顯微鏡下的菌體特徵參考圖譜，並說明各種黴菌毒素的種類與限量標準以及產毒黴菌類別，可以讓讀者對產毒黴菌及黴菌毒素能有更進一步

的瞭解。 　　11. 本書特別比較各國之食品微生物衛生安全標準，將有助於業界瞭解其他國家的法規以作為食品進出口的參考。 　　12. 本書特別介紹食品廠的環境監控對象、監控技術以及ATP冷光儀的應用，並且介紹從供膳人員糞便中檢測常見致瀉性病原菌的實用技術。 　　13. 本書強調建立食品微生物優良檢驗室的重要性及運作方式，強調人、時、事、地、物所應關注的事項，值得檢驗人員配合。 　　總之，本書內容為食品微生物檢驗方法試圖提供5W/1H分析法[why(為何)、What(何事)、Where(何地)、Who(何人)、When(何時)及How(如何)]的解答。因此，適合作為就讀食品科技系及食品安全

研究所學生修習微生物檢驗技術之教科書/參考書，也適合食品生產廠家的人員進行「從農場到餐桌」各環節品管的工具書。同時，亦可應用於衛生主管部門督導及監控食品安全的重要參考依據。  

rt-pcr檢驗進入發燒排行的影片

乙型利鈉胜肽透過活化基質金屬蛋白酶-2之表現情形增強小鼠心房組織及人類心房肌纖維母細胞之纖維化作用

為了解決rt-pcr檢驗的問題，作者蔡宜廷 這樣論述：

在西元2001年美國食品藥品監督管理局已核可將乙型利鈉胜肽(BNP)作為心臟衰竭之治療用藥。然而，在臨床使用後未達預期療效，甚至加速腎臟功能損傷，因此BNP用於心臟衰竭之治療上仍有許多爭議，需待更多基礎研究來進一步釐清。近年來臨床統計發現血液中長期呈現乙型利鈉胜肽較高之個案發生心房顫動的比例明顯較高，科學家推測BNP是扮演著促進心房顫動與纖維化之危險因子，然而其真正機制未明。 本篇研究探討BNP對於心房纖維化及心房顫動影響，以腫瘤壞死因子(TNF-α)注射導致之心房纖維化小鼠為動物模式以及利用心臟手術過程中因建立體外循環而剪下的右心房心耳分離培養出之人類心房肌纖維母細胞為材料進行細胞相

關研究。研究發現以TNF-α注射導致心房纖維化之小鼠再給予注射BNP時，會活化基質金屬蛋白酶-2 (MMP-2)表現量及膠原蛋白(collagen)堆積來加劇心房纖維化情形。細胞實驗部分，以BNP處理人類心房肌纖維母細胞亦能觀察到MMP-2表現量增加，更進一步以蛋白合成抑制劑cycloheximide 處理細胞並無發現特殊意義，然而利用蛋白酶體抑制劑MG132 刺激細胞會更增加BNP刺激所造成的MMP-2表現量上升，證明蛋白穩定度及抑制蛋白酶體調控蛋白之降解路徑參與其中。抑制SIRT1表現明顯減少BNP刺激所造成的MMP-2表現量上升，此外免疫螢光染色及免疫沉澱法的結果都指出MMP-2和SIR

T1之間具有交互作用，造成MMP-2去乙醯化進而增加蛋白穩定度。最後利用小鼠纖維化心房組織證明SIRT1和MMP-2共定位於細胞質，由實驗結果可推論BNP在心房扮演著促進心房纖維化之作用角色。

分子克隆實驗指南（上中下）（原書第四版）

為了解決rt-pcr檢驗的問題，作者（美）M.R.格林 這樣論述：

分子克隆技術30多年來一直是全球生命科學領域實驗室專業技術的基礎。冷泉港實驗室出版的《分子克隆實驗指南》一書擁有的可靠性和*性，使本書成為業內流行、具影響力的實驗室操作指南。第四版的《分子克隆實驗指南》保留了之前版本中備受讚譽的細節和準確性，10個原有的核心章節經過更新，反映了標準技術的發展和創新，並介紹了一些前沿的操作步驟。同時還修訂了第三版中的核心章節，以突出現有的核酸製備和克隆、基因轉移及表達分析的策略和方法，並增加了12個新章節，專門介紹激動人心的研究策略，包括利用DNA 甲基化技術和染色質免疫沉澱的表觀遺傳學分析、RNAi、新一代測序技術，以及如何處理數據生成和分析的生物信息學，例如

介紹了分析工具的使用，如何比較基因和蛋白質的序列，鑑定多個基因的常見表達模式等。 本書還保留了必不可少的附錄：包括試劑和緩衝液、常用技術、檢測系統、一般安全原則和危險材料。任何使用分子生物學技術的基礎研究實驗室都將因擁有一冊《分子克隆實驗指南》而受益。 本書可作為學習遺傳學、分子細胞生物學、發育生物學、微生物學、神經科學和免疫學等學科的重要指導，可供生物學、醫藥衛生，以及農、林、牧、漁、檢驗檢疫等方面的科研、教學與技術人員參考。 Originally published in English as Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Fourth

Edition, by MichaelR.Green and Joseph Sambrook ? 2012 Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork, USA? 2017 Science Press. Print in China.Authorized Simplified Chinese translation of the English edition ? 2012 Cold Spring Harbor LaboratoryPress. This translation is published a

nd sold by permission of Cold Spring Harbor Laboratory Press, the owner of all rights to publish and sell the same. 《分子克隆實驗指南·上冊》目錄： 第1章DNA的分離及定量 導言 方案1SDS鹼裂解法製備質粒DNA：少量製備 方案2SDS鹼裂解法製備質粒DNA：大量製備 方案3從革蘭氏陰性菌（如E.coli）中分離DNA 方案4乙醇法沉澱DNA 方案5異丙醇法沉澱DNA 方案6用微量濃縮機進行核酸的濃縮和脫鹽 方案7丁醇抽提法濃縮核酸 方案8聚乙二醇沉澱法製

備M13噬菌體單鏈DNA 方案9M13噬菌體鋪平板 方案10M13噬菌體液體培養 方案11M13噬菌體雙鏈（複製型）DNA的製備 方案12利用有機溶劑分離純化高分子質量DNA 方案13用蛋白酶K和苯酚從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA 方案14一步法同時提取細胞或組織中的DNA、RNA和蛋白質 方案15從鼠尾或其他小樣本中製備基因組DNA 替代方案：不使用有機溶劑從鼠尾分離DNA 替代方案：一管法從鼠尾中分離DNA 方案16快速分離酵母DNA 方案17微型凝膠電泳後使用溴化乙錠（EB）估算條帶中DNA數量 方案18利用Hoechst33258通過熒光分析儀估算DNA濃度 方案19用PicoG

reen定量溶液中的DNA 信息欄 第2章DNA分析 導言 方案1瓊脂糖凝膠電泳 方案2瓊脂糖凝膠中DNA的染色檢測 方案3聚丙烯酰胺凝膠電泳 方案4聚丙烯酰胺凝膠中DNA的染色檢測 方案5聚丙烯酰胺凝膠中DNA的放射自顯影檢測 方案6鹼性瓊脂糖凝膠電泳 附加方案：鹼性瓊脂糖凝膠的放射自顯影 方案7成像：放射自顯影和感光成像 方案8用玻璃珠從瓊脂糖凝膠中回收DNA 方案9低熔點瓊脂糖凝膠中DNA的回收：有機溶劑抽提法 方案10聚丙烯酰胺凝膠中DNA片段的回收：壓碎與浸泡法 方案11Southern印跡 方案12Southcm印跡：DNA從一塊瓊脂糖凝膠同時向兩張膜轉移 方案13採用放射性標記探

針對固定在膜上的核酸DNA進行Southern雜交 附加方案：從膜上洗脫探針 信息欄 第3章質粒載體克隆與轉化 導言 方案1製備和轉化感受態大腸桿菌的Hanahan方法：高效轉化策略 方案2製備和轉化感受態大腸桿菌的Inoue方法：“超級感受態”細胞 方案3大腸桿菌的簡單轉化：納米顆粒介導的轉化 替代方案：一步法製備感受態大腸桿菌：在同一溶液中轉化和儲存細菌細胞 方案4電穿孔法轉化大腸桿菌 方案5質粒載體克隆：定向克隆 方案6質粒載體克隆：平末端克隆 方案7質粒DNA的去磷酸化 方案8向平末端DNA添加磷酸化銜接子／接頭 方案9克隆PCR產物：向擴增DNA的末端添加限制性酶切位點 方案10克隆

PCR產物：平末端克隆 方案11克隆PCR產物：製備T載體 方案12克隆PCR產物：TA克隆 方案13克隆PCR產物：TOPOTA克隆 方案14使用X—Gal和IPTG篩選細菌菌落：α—互補 信息欄 第4章Gateway重組克隆 導言 方案1擴增Gateway載體 方案2製備可讀框入門克隆和目的克隆 方案3應用多位點LR克隆反應製備目的克隆 信息欄 第5章細菌人工染色體及其他高容量載體的應用 導言 方案1BAC DNA的小量分離和PCR檢驗 方案2BAC DNA的大量製備和線性化 方案3通過脈衝電場凝膠電泳檢驗BAC DNA的質量和數量 方案4兩步BAC工程：穿梭載體DNA的製各 方案5A同源

臂（A—Box）和B同源臂（B—Box）的製備 方案6克隆A和B同源臂到穿梭載體 方案7重組穿梭載體的製備和檢驗 方案8通過電穿孔法轉化重組穿梭載體到感受態BAC宿主細胞 方案9共合體的檢驗和重組BAC克隆的篩選 方案10一步BAC修飾：質粒製備 方案11A同源臂（A—Box）的製備 方案12克隆A同源臂到報導穿梭載體 方案13用RecA載體轉化BAC宿主 方案14轉移報導載體到BAC／RecA細胞以及共合體的篩選 方案15釀酒酵母（S.cerevisiae）的生長和DNA製備 方案16酵母DNA的小量製備 信息欄 第6章真核細胞RNA的提取、純化和分析 導言 方案1從哺乳動物的細胞和組織中提

取總RNA 替代方案從小量樣本提取RNA 方案2從斑馬魚胚胎和成體中提取總RNA 方案3從黑腹果蠅提取總RNA 方案4從秀麗隱桿線蟲中提取總RNA 方案5從釀酒酵母菌中採用熱酸酚提取總RNA 方案6RNA定量和儲存 方案7RNA的乙醇沉澱 方案8通過無RNase的DNaseI處理去除RNA樣品中的DNA污染 方案9Oligo（dT）磁珠法提取poly（A）+mRNA 方案10按照大小分離RNA：含甲醛的瓊脂糖凝膠電泳 方案11根據分子質量大小分離RNA：RNA的尿素變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 方案12瓊脂糖凝膠中變性RNA的轉膜和固定 替代方案下行毛細管轉移 方案13聚丙烯酰胺凝膠的電轉移和膜固定

方案14Northern雜交 方案15純化RNA的點雜交和狹縫雜交 方案16用核酸酶S1對RNA作圖 方案17核糖核酸酶保護分析：用核糖核酸酶和放射性標記的RNA探針對RNA作圖 方案18引物延伸法分析RNA 信息欄 第7章聚合酶鏈反應 導言 方案1基礎PCR 方案2熱啟動PCR 方案3降落PCR 方案4高GC含量模板的PCR擴增 方案5長片段高保真PCR（LAPCR） 方案6反向PCR 方案7巢式PCR 方案8mRNA反轉錄產物cDNA的擴增：兩步法RT—PCR 方案9由mRNA的5’端進行序列的快速擴增：5’—RACE 方案10由mRNA的3’端進行序列的快速擴增：3’—RACE 方案1

1使用PCR篩選克隆 信息欄 第8章生物信息學 導言 方案1使用UCSC基因組瀏覽器將基因組註釋可視化 方案2使用BLAST和ClustaIW進行序列比對和同源性檢索 方案3使用Primer3Plus設計PCR引物 方案4使用微陣列和RNA—seq進行表達序列譜分析 方案5將上億短讀段定位至參考基因組上 方案6識別ChIP—seq數據集中富集的區域（尋峰） 方案7發現順式調控基序 信息欄 …… 《分子克隆實驗指南·中冊》 《分子克隆實驗指南·下冊》

大岩桐TCP轉錄因子之特性分析

為了解決rt-pcr檢驗的問題，作者葉柏宏 這樣論述：

TEOSINTE-BRANCHED 1/CYCLOIDEA/PCF (TCP)家族為植物獨有的轉錄因子，到了開花植物，由於基因不斷地複製特化產生新功能，其成員廣泛地被報導參與調控植物形態生長、營養及生殖器官發育，包含枝條、葉、花部、尤其是花兩側對稱性發育。然而，過往僅有少數非模式物種之 TCP轉錄因子基因家族被全面地進行序列釣取及檢驗其表現，以了解其參與了哪些器官的重要發育。野生種大岩桐有兩側對稱花，及突變反轉成輻射對稱花的馴化栽培品系；而且大岩桐屬植物，其葉部形態具有豐富的變異，可用來檢驗其TCP家族成員是否參與了花或葉的發育過程。為了解TCP基因在大岩桐的角色，我們從花瓣轉錄體中鑑定出3

0個TCP基因。為了釐清TCP基因對花及葉的發育角色，我們先重建大岩桐所有TCP基因演化樹，結果發現有15個Class I TCP基因和15個Class II TCP基因，其中Class II 包含3個CYC/TB1亞群TCP基因以及12個CIN亞群TCP基因。進一步分析TCP基因的序列結構，結果發現在CYC/TB1亞群中的TCP基因(SsTCP1, 13, 22)皆具有R domain，推測與蛋白質之間的交互作用有關。另外在CIN亞群中，SsTCP 19, 20, 27, 28, 29具有被miR319a調節的辨識位，可能和之前文獻報導的葉上下表面極性發育有關。而在RT-PCR檢驗其在發育時

期及組織表現位置的結果，發現Class I TCP基因廣泛地在營養時期和繁殖時期有表現，Class II的CYC/TB1亞群主要在花表現，而在CIN亞群主要在葉表現。且大岩桐TCP基因數量比阿拉伯芥多，顯示似乎有多次基因複製多樣化現象，且這些複製出的基因有表現形式互補的現象或是組織專一性情況。如 CYC/TB1亞群中，SsTCP1, 22在花的時期有高表現，而CIN亞群的TCP基因在營養時期的組織有高表現。另外，SsTCP9、SsTCP22只在繁殖時期有表現以及背側花瓣的表現量高於腹側花瓣。另一方面，先前研究指出TCP轉錄因子常需透過形成同型或異型雙聚合體之方式對下游基因進行調控，且有些 TC

P轉錄因子會進行自體調控或是相互調控。本研究以酵母菌雙雜合系統，來檢驗TCP蛋白間的交互作用關係，進一步推測其如何參與大岩桐的發育。結果顯示SsTCP有7個的同型蛋白質雙聚合體和57個異型蛋白質雙聚合體產生。而CIN亞群和CYC/TB1亞群相較下，CIN亞群基因間幾乎兩兩都有交互作用，而在CYC/TB1亞群基因間，則少數具有同型雙聚合體或異型雙聚合體產生，且與CIN亞群之間的蛋白質交互作用也較少。表示TCP轉錄因子傾向於各自分群內形成同體或異體雙聚合體，而群間有較少的交互作用。另外，CIN亞群在營養器官中會廣泛表現，可能是因傾向和其他TCP蛋白質形成雙聚合體，來一同調控下游基因。因此透過全面性

的分析大岩桐TCP家族成員有助於進一步的瞭解其演化關係及基因特性，替往後研究，如功能性分析提供了TCP基因之基礎訊息。