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高靈敏度數據非依賴性採集質譜技術: 從微量蛋白體學至單細胞蛋白體學

為了解決inaccessible中文的問題，作者史昂德 這樣論述：

蛋白質質譜法是鑑定複雜生物系統中蛋白質體的一種工具。然而，深度蛋白質體分析需要大量的細胞、組織或臨床樣品，並且涉及許多處理步驟，實驗設計經常需要在可獲取的樣本大小和蛋白質體覆蓋率之間進行權衡。因此，高效率且靈敏的方法將促進蛋白質體學在微量樣品中的應用。為了解決以上問題，我們在本論文開發了高靈敏度的蛋白質體學方法，並且應用於微量至單細胞的蛋白質體分析。首先，我們應用了Stage Tip方法來評估微克級樣品的靈敏度，從約1微克的細胞裂解液中鑑定到超過2000種蛋白質，並且具有良好再現性。接著，為了串聯微流體裝置以進行更微量蛋白質體樣品實驗，我們建立一套一鍋化微量蛋白質體樣品製備法，可對少量細胞進

行深度定量蛋白質體分析（約5000顆細胞可鑑定 >4000種蛋白質）。最後，我們將該方法應用於微流體晶片（稱作iProChip），並且結合數據非依賴性採集質譜法，建立了一個精簡的微量蛋白質體實驗流程。利用晶片進行樣品製備，以及客製化的圖譜資料庫進行數據非依賴性採集圖譜比對。我們在20顆哺乳動物細胞中，平均每顆細胞可鑑定到約1,500種蛋白質，為迄今最靈敏的單細胞蛋白質體分析之一。將此方法應用至貼附和非貼附癌症細胞的分析，定量動態範圍可以穩定地到達5個數量級，並可測到重要的藥物靶點和訊號傳遞物質，每次質譜分析之間的缺失值(missing values) 小於16%。此外，我們發展了樣品大小相容圖

譜資料庫（sample size-comparable spectral library）的策略，可增加少量樣品的蛋白質鑑定數。例如，在0.75奈克（約5顆細胞）和1.5奈克（約10顆細胞）可以分別鑑定2380和3586種蛋白質，擁有很高的蛋白質體覆蓋率，且具有良好再現性（三重覆分析為 86%-99%）。在圖譜相似性分析中，我們發現實驗圖譜和圖譜資料庫的碎片離子模式之相似度對於比對低豐度蛋白質扮演非常重要的作用。總結來說，我們開發新穎的方法將蛋白質體樣品製備整合到一個小型化平台上，從而為微量蛋白質體學和單細胞蛋白質體學的應用提供進階方法。關鍵字：蛋白質體學、微量蛋白質體學、單細胞蛋白質體學、數

據非依賴性採集、質譜技術 

偏遠小學學童低碳飲食認知與蔬食日行為影響之研究- 以臺南市南化區為例

為了解決inaccessible中文的問題，作者張純純 這樣論述：

良好飲食習慣需從小建立，為了「健康促進」及「環保低碳」之目的，政府教育單位推動「每週一日蔬食日」政策，這項政策是希望學童藉由低碳飲食知識與蔬食日行為薰陶下，由建立的正確飲食觀念與行為，進而晉升成為「低碳飲食永續行為」。這將對自身健康與環境保護都帶來極大好處，然而這「低碳飲食永續行為」執行成效為何？對生活機能與交通條件皆不便、文化刺激不足、社會風氣封閉、數位環境不利及學生數少等因素之偏鄉學校學童是否有影響力？這是個值得探討的議題。 本研究之目的在探討臺南市偏遠小學學童低碳飲食認知與蔬食日行為影響分析，利用問卷資料蒐集方法，以110學年度臺南市南化區公立國小學童173人為研究對象進

行紙本問卷普查，回收有效問卷共計169份。除個人背景項目外，將「低碳飲食認知」、「蔬食日行為」及「低碳飲食永續行為」設計為三個量表。問卷回收資料，使用SPSS統計軟體進行描述性統計分析、T檢定分析、單因數變異數分析、及迴歸分析。研究結果如下： 1.不同背景變項的偏鄉小學學童對低碳飲食認知部分顯著差異。 2.不同背景變項的偏鄉小學學童對蔬食日行為部分顯著差異。 3.低碳飲食認知對蔬食日行為部分顯著正向影響。 4.低碳飲食認知對低碳飲食永續行為部分顯著正向影響。 5.蔬食日行為對低碳飲食永續行為顯著正向影響。 6.蔬食日行為在低碳飲食認知對低碳飲食永續行為間有中介效果。 本研究主

要為臺南市南化區國小學童低碳飲食認知、蔬食日行為及低碳飲食永續行為研究結果之相關建議，作為日後對偏鄉國小學童推動低碳飲食認知及蔬食日行為活動與後續研究之參考用，期許一起愛護我們所居住的地球， 讓「低碳飲食永續行為」之落實不只是口號。