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小蘗鹼對人類腎臟癌細胞RCC細胞株分泌介白素-6之影響

為了解決hermle離心機的問題，作者劉思敏 這樣論述：

小蘗鹼(berberine)為異喹啉生物鹼延伸物(Isoquinoline derivatives alkaloid)，存在於傳統藥用植物黃連之根部。研究報告指出小蘗鹼具有解熱、鎮痛、抗發炎、降血脂、抗癌作用。人類腎臟癌細胞(renal cell carcinoma, RCC)源於腎臟近端腎小管表皮，研究中發現腎細胞癌的病患血中介白素-6 (interleukin-6,IL-6)的濃度比正常狀態高，RCC細胞株能夠分泌IL-6，有文獻指出IL-6能造成RCC細胞株增生與分化，小蘗鹼對RCC細胞株分泌IL-6的影響仍尚未清楚。本實驗設計主要在探討小蘗鹼對於RCC細胞株786-O與A498分泌I

L-6的影響及其相關的傳導路徑。本研究將以下所示步驟進行：(1)以不同濃度之小蘗鹼處理RCC細胞株，以ELISA檢測培養液IL-6濃度；(2)以RT-PCR檢測RCC 其IL-6 mRNA之表現；(3)以Western blot檢測小蘗鹼影響RCC分泌IL-6之訊號傳遞途徑；(4)以Flow cyrometry檢測經小蘗鹼處理之RCC細胞株其細胞週期之影響。結果顯示：(1) 以不同濃度小蘗鹼(0.01μM~10μM)處理RCC細胞株，小蘗鹼會促進786-O與A498分泌IL-6；(2)以10μM小蘗鹼在不同時間點處理RCC細胞株，786-O與A498細胞株其IL-6 mRNA表現量在4小時有上

升的情形；(3)以不同濃度的小蘗鹼(0.01μM~10μM) 處理RCC細胞株其A498與786-O之IL-6 mRNA表現量依dose-dependent而增加；(4)以西方墨點法證實小蘗鹼對786-O及A498細胞株對經過ERK、JNK及p38等MAPK路徑無顯著的影響；(5)以JAK2、ERK、JNK與p38路徑的抑制劑處理RCC細胞株觀察其IL-6分泌，再以小蘗鹼處理786-O及A498細胞株其IL-6並未得到顯著的上昇；(6)flow cytometry的結果顯示小蘗鹼會使RCC細胞株在週期S phase的細胞數量增加。以上結果顯示小蘗鹼能增加IL-6 mRNA使IL-6分泌增加，促

進細胞週期中S phase的細胞數量，顯示小蘗鹼影響細胞增生而達促進IL-6分泌量。