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國立中興大學 動物科學系所 王建鎧、江信毅所指導 黃覺思的 乳牛轉換期血液免疫細胞調節與維生素E關聯性探討 （2020），提出google即時轉錄關鍵因素是什麼，來自於乳牛、轉換期、負能量平衡、非酯化脂肪酸、β-羥基丁酸、維生素E、外周血單核細胞、多形核白血球、發炎相關細胞激素。

而第二篇論文國立中興大學 昆蟲學系所 吳明城所指導 徐志寬的 花粉蜂糧之真菌菌叢相分析與黑酵母(Aureobasidium melanogenum) CK–CsC之發酵產物對蜜蜂生理影響 （2020），提出因為有 花粉蜂糧、真菌、胞外多醣、蜜蜂營養、蜜蜂免疫的重點而找出了 google即時轉錄的解答。

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乳牛轉換期血液免疫細胞調節與維生素E關聯性探討

為了解決google即時轉錄的問題，作者黃覺思 這樣論述：

乳牛轉換期，即分娩前後三周，對其生理調節機制影響甚大。在此階段，乳牛能量需求增加以應付泌乳需求，若採食量下降，能量攝取不足，容易發生能量負平衡 (Negative energy balance, NEB) 的現象。為彌補能量不足的現象，將動員脂肪，產生可供利用的非酯化脂肪酸 (Non-esterified fatty acid, NEFA) , 而過量NEFA在肝臟代謝後產生beta-羥基丁酸 (Beta-hydroxybutyric acid, BHBA)，引起酮症。NEFA及BHBA會造成牛隻體内氧化壓力 (Oxidative stress) 提升，干擾免疫細胞，造成免疫失衡進而引發炎症

疾病。免疫細胞主要分爲外周血單核細胞 (Peripheral blood mononuclear cell, PBMC) 及多形核嗜中性球 (Polymorphonuclear leukocytes, PMNL)，各自在發炎 (Inflammation) 調節機制上扮演不同角色，避免免疫失調。研究指出，免疫細胞PMNL在轉換期間，數量會顯著提升以應付發炎反應。而維生素E作爲一種細胞膜抗氧化物，能夠有效維持細胞膜之穩定，維持其通透性，提升細胞的訊號傳遞能力及基因表現對抗氧化壓力。故實驗目的為探討牛隻在轉換期時血液免疫細胞調節反應與維生素E之關聯性。實驗結果顯示，乳牛在分娩當天NEFA濃度較分娩前

一週顯著提升 (0.31mmol/l vs. 0.94mmol/l)，且血清中維生素E濃度則降到最低 (1.85 µg/ml vs. 1.44µg/ml)。血液的PMNL數量也在分娩當天較分娩前一週顯著提升 (4.99×108 cells vs. 8.42×108 cells)，PBMC則無顯著差異。以分娩當天各指標之相關性發現，血清中NEFA濃度與維生素E呈正相關 (R=0.71)，與PMNL細胞數呈負相關 (R=-0.59)；另外血清中維生素E與PMNL細胞數呈低度負相關 (R=-0.55)。以本試驗結果發現，血清中NEFA濃度對PMNL細胞數影響較大，當NEFA在分娩當天過高，將有可能導

致PMNL數量沒辦法提升。發炎相關細胞激素在透過即時聚合酶鏈鎖反應 (Real-time polymerase chain reaction, Real-time PCR) 的結果顯示，PBMC之發炎相關激素IL-1β及TNF-α在分娩當天並無顯著改變，與維生素E濃度之相關性發現，兩者分娩當天與維生素E呈負相關 (IL-1β: R=-0.6, TNF-α: R=-0.61)；PMNL之發炎相關細胞激素TNF-α表現量則在分娩當天較分娩前一週有顯著提升 (6.2倍)，與維生素E濃度之相關性發現，分娩當天與維生素E呈正相關 (R=0.62)。以目前研究結果推測，在牛隻分娩當天NEFA濃度的提升會造

成PMNL的數量減少，進而使血清中的維生素E沒辦法用於製造PMNL而滯留於血清中。綜上所述，後續試驗希望透過瞭解NEFA、PMNL增生與維生素E之關聯性，希望能夠瞭解維生素E在細胞膜上的作用機制，進而使免疫細胞能力正常運作，改善牛隻轉換期時發炎性疾病的發生率。

花粉蜂糧之真菌菌叢相分析與黑酵母(Aureobasidium melanogenum) CK–CsC之發酵產物對蜜蜂生理影響

為了解決google即時轉錄的問題，作者徐志寬 這樣論述：

蜜蜂（Apis mellifera）為自然界重要授粉者，是農業上重要經濟昆蟲，然而蜂群崩解症候群（colony collapse disorder, CCD）對蜜蜂營養與健康帶來壓力，隨後導致蜜蜂生理系統惡化，造成整體蜂群崩解。花粉作為蜜蜂重要的營養來源，其上承載著豐富的微生物菌叢，如：多種細菌和真菌，並與蜜蜂腸道中的微生物組成有相似之處。真菌具有豐富的代謝與合成能力，本論文研究聚焦於花粉蜂糧的真菌菌叢相探討，目前從茶花和油菜花粉蜂糧中分離出之菌種，藉由internal transcribed spacer regions (包含 5.8S rDNA) (ITS)序列分析得Aspergill

us spp.、Aureobasidium spp.、 Cladosporium spp.、Penicillinum spp.、Moniliella spp.等多種真菌類群，並將分離出的真菌進行酵素活性分析，發現部分菌株如：青黴屬Penicillinum oxalicum 真菌纖維素分解酶(cellulase)之透明代謝圈有5.1 cm，果膠分解酶(pectinase)酵素活性的明代謝圈則介於1.4 cm – 3.8 cm；推測具此二酵素活性之菌株可協助代謝花粉，使蜜蜂個體更易利用花粉營養；接著本研究聚焦於台灣茶花粉(Camellia sinensis )中所分離之Aureobasidium

melanogenum CK–CsC 發酵相關特性與對蜜蜂生理影響，在使用SYM培養基發酵後，胞外多醣產量由第一日4.4 mg/ mL增加至第五日15.8 mg/ mL， biomass則由第一日21.4 mg/ mL增至第五日43.4 mg/mL，蛋白質含量亦由第一日5.5 mg/mL上升至第五日21.6 mg/ mL，並使發酵環境由初始pH 7.5下降至第五日 pH 3.1，真菌多醣體在過去已被證實具多種生物性功能，其中beta–glucan更有著提升營養與增加宿主免疫的功能，因此推測蜂糧真菌所產的多醣體應有助於提升蜜蜂營養與免疫力。本研究透過將菌株CK–CsC 所產之發酵物，餵食給予蜂

群，觀察對蜂群存活率、營養以及免疫基因的表現，發現發酵上清液會使蜜蜂死亡上升，約40%，進一步試驗後發現，經酒精萃取出之胞外多醣(exopolysaccharides, EPS)是使蜜蜂死亡的主因，僅取食胞外多醣一週的組別存活率僅1-2成，但亦發現蜜蜂可透過補充花粉改善死亡現象，使存活率回升至7成；同時菌株CK-CsC之10日發酵菌液與發酵花粉能增強頭部營養基因王漿蛋白(mrjp1) 25倍的表現量，4日發酵菌液可促進腹部營養基因卵黃原蛋白(vg) 5.4倍的表現量，但無論4日或是10日發酵菌液皆會下調蜜蜂抗菌胜肽基因表現；接著本研究更進一步使用菌株CK-CsC以百花粉進行固態發酵，發酵花粉除

了對蜜蜂不具毒性外，更可增加蜜蜂在頭部營養基因mrjp1 14倍的表現量，腹部營養基因vg的基因表現量亦可增加5.4倍，且發酵花粉不會抑制蜜蜂抗菌胜肽的基因表現。接著本研究更進一步探討蜜蜂取食菌株CK–CsC 所分泌之胞外多醣體對腸道菌相的變化，初步分析發現，腸道中總菌體數量無明顯變化，而蜜蜂取食花粉時，會使腸道菌相中的γ–Proteobacteria 、 Bacteriodetes以及Actinobacteria的數量增加，推測該三菌門成員可協助代謝多醣體，降低其對蜜蜂造成的不良影響。經由本研究，更深入了解真菌特性，以及真菌發酵產物與宿主間的交互作用，期許未來可將其添加於花粉發酵，餵食給蜂群

，增強蜜蜂營養和免疫系統，使蜂群有更高的環境適應性。

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