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臺灣原生蘭科植物內生真菌之分布與其應用

為了解決D link R04的問題，作者鄭淑芬 這樣論述：

為了瞭解臺灣原生蘭科植物根部內生真菌之資源，並開發其有益微生物之共生資源，本研究於臺灣北、中、南三地區，自桃園縣復興鄉東眼山、新竹縣尖石鄉及五峰鄉鳥嘴山、苗栗縣南庄、南投縣仁愛鄉春陽、嘉義縣阿里山、屏東縣大漢山等25處，共採集得到分屬於34屬之69種原生蘭科植物，其中包括根節蘭屬(Calanthe)10種、豆蘭屬(Bulbohyllum)9種，及羊耳蘭屬(Liparis)8種等；此外，並進行根部內生真菌的分離與鑑定，共分離到內生真菌500餘株，經形態及分子鑑定結果顯示，以木黴菌(Trichoderma spp.)、鐮孢菌(Fusarium spp.)及炭角菌(Xylaria spp.)等三屬

真菌佔優勢，並且也分離出已有較多研究報導的絲核菌屬(Rhizoctonia spp.)之蘭菌。由此資源調查結果得知，同種類的蘭科植物分布在不同的地域環境，其根內內生真菌種類有所不同；而不同的蘭科植物種類，其根部內生真菌的種類也有所不同。進一步地，利用本研究及本研究室過去自原生蘭科植物分離之蘭菌，進行藥用與觀賞蘭科植物，包括臺灣金線連、綬草及紅鶴頂蘭等之接種試驗，觀察其對種子發芽、種苗生長與發育之影響，並進行蘭菌與生長環境對臺灣金線連藥效之影響評估。於臺大(海拔10公尺)、新店(海拔500公尺)、新竹縣五峰(海拔1,000公尺)等三個不同海拔地區，以塑膠袋栽培法(plastic bag cult

ivation method; PBCM)將臺灣金線連B(原生種與紅骨種雜交)及R(紅骨種)等兩種不同品系之盆栽，置於完全封閉的塑膠袋內，接種絲核菌屬蘭菌R02及R04，結果顯示以此法栽培7個月之所有B品系及R品系臺灣金線連組培苗，出瓶後之成活率均在80%以上，且可顯著提高植株產量，又不需施用任何化學農藥。此外，種植於臺大之臺灣金線連B及R兩品系，接種R02蘭菌之植株均有較高的總酚類及保肝活性成分金線連苷(AFEE)之含量。綬草種子接種發芽實驗結果顯示，絲核菌屬蘭菌普遍具有促進綬草種子發芽之能力，其中以接種生長於燕麥培養基之R02蘭菌，其促進發芽之效果最好，也最穏定。接種R02處理者，播種後1

5天可發芽，較無菌播種者(播種後75天才發芽)，約可提早2個月發芽。將綬草種子播種於預接種R02 15天之馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基，播種前刮除菌絲，可促進綬草種子發芽，40天後發芽率高達80.2%；未刮除菌絲者發芽率僅有11.2%，而未接種者發芽率為0%。將泥炭土與椰纖2：1體積比例，充分混合做為介質，種植綬草三個月有最高的成活率100%，及較佳的營養生長；利用20/15℃之溫度處理86天，以接種R02者所需到花日數最短；綬草於四種不同溫度處理86天後，移往簡易溫室120天，均以接種R15者，可促進地上部的生長，具較多的葉數；接種R19者，則可促進地下部的生長，具較多的根數及較重的根鮮重；於15

/13℃及20/15℃下，分別以接種蘭菌R15及R19者，可以促進綬草的生殖生長，增加其花梗數及花穗長。紅鶴頂蘭根部接種試驗，接種不同蘭菌R01、R02、R15、R19結果顯示，相較於對照組，接種適當的蘭菌可顯著提高紅鶴頂蘭瓶苗之移植成活率27-31%(R15) 及26-30%(R02)，增加株高6.3 公分(R15)、葉長3.5公分(R15)、花軸長度10.2公分(R19)，及每枝花軸之花朵數3.5朵，並增加其花的產量 (R19)。接種絲核菌R02的植株，其光合作用速率平均3.73 μmole m-2 s-1，顯著高於對照組，以及並可增加葉及假球莖之總碳水化合物含量，分別為24.5 mg·g

-1及90.9 mg·g-1。綜合本研究結果得知，臺灣原生蘭科植物根部具有豐富的內生真菌資源，原生蘭科植物所在的生長環境直接影響內生真菌的多樣性，各地區的環境和氣候為影響蘭科植物內生真菌種類的重要因子，蘭科植物的種類則為次要因子。應用絲核菌屬蘭菌於蘭科植物的接種試驗，臺灣金線連利用塑膠袋栽培法，配合蘭菌的接種，種植於海拔1,000公尺(日夜溫22/18℃)，可以快速大量生產無農藥的金線連，並提升其藥用效能；綬草接種蘭菌，可促進其種子發芽及營養生長，配合低溫春化及高溫處理，能促使花芽分化及花軸抽長之生殖生長；而紅鶴頂蘭接種適當種類的絲核菌屬蘭菌，亦可以增加組織培養小苗移植存活率，並藉由提高光合作

用速率，進而促進其生殖生長，增加植株之花梗與花朵數。因此，蘭菌接種技術的應用，具有保護與復育原生蘭科植物的目的，並具有開發為商業化大量生產蘭科植物之潛力。