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讓你的腦子動起來!科學思維訓練遊戲：魔術師的精彩魔術×科學大師的經典實驗×不法分子的神祕騙術，透過遊戲訓練你的思考力

為了解決騰達行的問題，作者張祥斌 這樣論述：

「不懂遊戲的人就不懂生活。」   發現科學的祕密，感受科學的魅力 科學可以啟發人的智慧，遊戲會帶來心靈的愉悅， 當科學與遊戲撞出智慧的火花時，科學遊戲就誕生了！   生活科學╳自然科學╳地理科學╳生物科學 偵探科學╳密碼科學╳魔術解密╳騙術揭祕 本書將以問答方式帶你來一趟奇異魔幻的科學之旅──   　　【生活科學】 　　把問題當成一種遊戲，把思考當成一種樂趣， 　　懂得生活科學就能科學生活，你的生活IQ就會越來越高！   　　▎萬能溶液 　　一個年輕人想要到大發明家愛迪生的實驗室裡工作。 　　年輕人說：「我想發明一種萬能溶液，它能溶解一切物品。」 　　愛迪生聽完以後，笑了笑便提出有關「萬能

溶液」的問題， 　　年輕人瞬間啞口無言，你知道愛迪生提出問題是什麼嗎？   　　▎盲人分衣 　　有兩個盲人一起去買衣服，兩人各自買了一件黑衣服和一件白衣服。 　　他們回家後發現衣服已混在一起，四件衣服的質地、大小是一樣的。 　　你能區分黑衣服和白衣服，讓他們每個人都各有一件嗎？   　　【自然科學】 　　從原始社會到現代社會，人類都在享用化學成果， 　　快跟著遊戲，在物理、化學的世界裡盡情遨遊吧！ 　　 　　▎筆直的煙 　　輪船以每小時10公里左右的速度航行， 　　輪船煙囪冒出的煙是筆直上升的。 　　你認為這種情況可能發生嗎？   　　▎用兩根吸管喝汽水 　　口含兩根吸管，一根插到一個裝有汽水

的杯子裡， 　　另一根露在杯子外面，你能從吸管中喝到汽水嗎？   　　注意：不要用舌頭堵住露在杯子外面的那根吸管， 　　也不要用手指堵住這根吸管的另一頭，否則算犯規！   　　【偵探科學】 　　犯罪行為的實施必然和一定的時間、空間人和事物有關聯， 　　指紋、鞋印、血跡、毛髮、纖維……在犯罪現場留下痕跡。 　　懂科學，你也能成為偵探，用雙眼和大腦將罪犯繩之以法！   　　▎千慮一失 　　寒冷的冬夜，一名出診的內科醫生被人開車撞死了。 　　肇事者將屍體和出診的皮包一起裝進車子裡，快速逃離現場。 　　肇事者在路上轉了很長時間，由於車內太熱，再加上作賊心虛， 　　他大汗涔涔，嚇得半死，冷靜下來後，他便

把屍體扔在池塘裡。 　　「這個屍體在被扔入池塘之前，一定是在24℃的環境中待過。」 　　警官檢查了溼透而冰冷的屍體和皮包後，一眼看出肇事者的破綻。 　　你能夠解釋這位警官是怎麼知道的嗎？   　　【密碼科學】 　　無論是犯罪分子或偵探都將密碼作為達到目的的重要手段， 　　字謎更是當仁不讓！用字謎破案不是神話，中國自古有之。   　　▎無自家書 　　一個在外謀生的人託同鄉帶給妻子一封信和一包銀子。 　　同鄉偷看信，看到裡面只有一幅畫── 　　畫上有一棵樹，樹上有八隻八哥、四隻斑鳩。 　　他一想，信中並沒寫多少銀子，於是便將銀子偷偷扣了一半。 　　誰知見到其妻子後，她拿著信說：「為什麼只剩五十兩了

？」 　　你能猜出她如何知道原來有銀子一百兩嗎？   本書特色   　　本書精選了實用且有趣的科學思維訓練遊戲，參照通行的科學分類體系，根據訓練遊戲的實際情況，將全書分為八章並詳細的分析、講解及揭祕。本書集科學性、知識性、實用性和趣味性於一體，能使讀者在遊戲中學習科學，在遊戲中收獲樂趣，成為「科學達人」。

騰達行進入發燒排行的影片

利用不同生物分子交互作用技術探討抗病毒化合物與腸病毒D68型2B蛋白、腸病毒A71型VP1蛋白交互作用

為了解決騰達行的問題，作者蔡杰澐 這樣論述：

目錄指導教授推薦書口試委員審定書致謝 iii中文摘要 ivAbstract v目錄 vi圖目錄 xii表目錄 xiv第一章 緒論 11.1 腸病毒 11.1.1 腸病毒分類 11.1.2 流行病史 11.1.3 感染途徑與臨床症狀 31.1.4 結構特性 31.1.5 腸病毒生命週期 41.1.6 結構蛋白 VP1 61.1.7 非結構蛋白 2B 61.1.8 腸病毒A71型、D68型疫苗及抗病毒藥物發展 71.2 本研究中所使用的小分子化合物 91.2.1 迷迭香酸（Rosmarinic

acid；RA）與其抑制腸病毒A71型機轉 91.2.2 BPREV0066S0（PR66）與其抑制腸病毒A71型機轉 101.2.3 CGU–V008與其抑制腸病毒D68型機轉 101.3 本實驗中探討生物分子間交互作用的技術 111.3.1 生物膜干涉技術（BioLayer Interferometry；BLI） 111.3.2 恆溫滴定量熱儀（Isothermal Titration Calorimeter；ITC） 121.3.3 熱位移測定（Thermal shift assay；TSA） 12第二章 研究目的 13第三章 實驗材料與方

法 143.1 實驗材料 143.1.1 病毒株 143.1.2 細菌株 143.1.3 蛋白質表達質體 143.2 緩衝液與試劑 153.2.1 一級抗體 153.2.2 二級抗體 163.2.3 10x PBS （phosphate buffered saline） 163.2.4 PBS–T 163.2.5 10%（w/v）SDS（Sodium dodecyl sulfate） 163.2.6 3x Sample buffer（Reducing sample buffer） 163.2.7 10x Running b

uffer 173.2.8 Transfer buffer 173.2.9 Blocking buffer 173.2.10 結合緩衝液（binding buffer） 173.2.11 清洗緩衝液（wash buffer） 173.2.12 沖提緩衝液（Elution buffer） 173.2.13 Lysogeny broth（LB） 183.2.14 蛋白質膠體固定染色液（Coomassie blue staining solution） 183.2.15 蛋白質膠體退染液（Fast destain solution） 183.2.

16 200 mM IPTG（Isopropyl β – D – 1 – thiogalactopyranoside） 183.2.17 抗生素 183.3 標準方法 183.3.1 細菌培養（Bacterial culture） 183.3.2 製備勝任細胞（Competent cell） 183.3.3 轉型作用（Transformation ） 193.3.4 IPTG誘導（IPTG induction）for BL21 DE3、BL21 DE3 – pLysS 203.3.5 IPTG誘導（IPTG induction）for Lemo 21（

DE3） 203.3.6 IPTG誘導（IPTG induction）for BL21 Codonplus 203.3.7 均質（Homogenization） 213.3.8 重組蛋白純化（Recombinant protein purification） 213.3.9 蛋白質膠體染色（Coomassie blue staining） 223.3.10 西方墨點法（Western blot） 223.3.11 蛋白質透析轉換緩衝液 223.3.12 蛋白質濃縮 223.3.13 生物膜干涉技術（BioLayer Interferometry；

BLI） 233.3.14 恆溫滴定量熱儀（Isothermal Titration Calorimeter；ITC） 233.3.15 熱位移實驗 （Thermal shift assay; TSA） 243.3.16 聚合酶連鎖反應（Polymerase Chain Reaction；PCR）與菌落篩選型PCR（Colony PCR） 253.3.17 酵素切割（Digestion） 263.3.18 接合反應（Ligation） 26第四章 實驗結果 274.1如何提高重組蛋白表現量 274.2 EV-A71 VP1純化重組蛋白質條件最佳化

284.2.1 EV-A71 VP1重組蛋白表達於E.coli strain的選擇 284.2.2 VP1重組蛋白表達溫度之最佳化 294.2.3 純化步驟的優化 304.2.4 Elution buffer 中imidazole 濃度之最佳化 314.2.5 使用上述條件做一次完整的重組蛋白純化並轉換緩衝液和濃縮 324.2.6 利用不同技術測試化合物RA與VP1重組蛋白之交互作用 334.2.7 利用不同技術測試化合物PR66與VP1重組蛋白之交互作用 344.3 EV-D68 2B純化重組蛋白質條件最佳化 344.3.1 EV-D6

8 2B胺基酸序列分析 344.3.2 EV-D68 2B重組蛋白表達於E.coli strain的選擇 354.3.3 2B重組蛋白表達溫度之最佳化 364.3.4 2B蛋白全基因合成 364.3.5 優化過的2B序列與原始2B序列在不同菌株中表達的差異 374.3.6 密碼子優化過的2B序列重新構築到pET 22b、pET 32a載體上 394.3.7 EV-D68 2B – pET 22b – O2、EV-D68 2B – pET 32a – O1的少量表現純化 394.3.8 EV-D68 2B – pET 22b – O2、EV-D68 2B

– pET 32a – O1的大量表現純化 404.3.9 Binding buffer中imidazole 濃度的最佳化 404.3.10 2B重組蛋白在純化中出現非預期表達分子量 41第五章 討論 425.1 EV-A71 VP1、EV-D68 2B重組蛋白之討論 425.2 利用不同技術測試化合物RA與VP1重組蛋白之間的交互作用 445.3利用不同技術測試化合物PR66與VP1重組蛋白之間交互作用 45第六章圖表 47第七章參考文獻 87附錄 111圖目錄圖 一、EV-A71 VP1蛋白於不同competent菌株及溫度的表

達 53圖 二、利用西方墨點法確認EV-A71 VP1蛋白於不同溫度的表達 54圖 三、優化沖提EV-A71 VP1重組蛋白imidazole buffer之濃度 55圖 四、純化的VP1重組蛋白經由濃縮管轉換緩衝液及濃縮 57圖 五、使用BLI檢測RA和VP1重組蛋白之交互作用。 61圖 六、使用ITC檢測RA和VP1重組蛋白之交互作用 63圖 七、使用TSA檢測PR66和VP1重組蛋白之交互作用 65圖 八、使用不同的生物資訊工具對2B胺基酸序列進行分析 66圖 九、EV-D68 2B蛋白於Lemo 21（DE3）菌株進行IPTG誘導

68圖 十、EV-D68 2B蛋白於BL21 CodonPlus菌株進行IPTG誘導 69圖 十一、EV-D68 2B蛋白於30℃、37℃的表達情況 71圖 十二、EV-D68 2B蛋白於20℃、37℃的表達情況 74圖 十三、密碼子優化前後序列在不同competent菌株中表達 77圖 十四、重新構築2B蛋白表達質體示意圖 78圖 十五、密碼子優化2B序列在不同載體上的少量表現與純化 80圖 十六、密碼子優化2B序列在不同載體上的大量表現純化 82圖 十七、提高binding buffer 中imidazole的濃度進行純化 84圖 十八、2B

蛋白在純化過程中可能形成dimer 86表目錄表 一、Insert序列 47表 二、腸病毒抑制劑 49表 三、引子序列 52

IELTS 雅思閱讀 情境學習法：漸進理解 10 大情境、 圖表題

為了解決騰達行的問題，作者賴世雄,AndrewBetsis,LawrenceMamas 這樣論述：

　　最專業的10大必考情境、圖表題 + 最全面的海量試題及破題攻略 + 最精準的翻譯解析 　　輕鬆掌握雅思閱讀應考攻略，高效練習提升應考實戰力！ 　　常春藤最強編輯團隊X英國權威英檢出版社Global ELT聯手出擊 本書特色 　　 　　◆    10大熱門情境，重點一網打盡 　　◆    14 大必考題型，攻略練習雙效合一 　　◆    海量練習題，打造作答神實力 　　◆    翻譯解析最齊全，自我提升好便利 　　1.    10大熱門情境，重點一網打盡 　　深度剖析雅思閱讀測驗最常出現的10大情境，漸進式帶領讀者做深度與廣度兼具的訓練，並建立答題觀念。 　　2. 

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包括：雅思、托福、多益、劍橋國際英語認證……等。除了考試書籍，Global ELT也出版許多英語學習書籍，如文法、聽說讀寫、字彙、ELT字典、慣用語與動詞片語、英語學習主教材及各類分級讀本等。  

天然植物對胃癌與乳癌死亡機制探討第一部份卡瓦胡椒素B誘導人類胃腺癌細胞自噬之機制探討;第二部份香杉芝誘導人類三陰性乳腺癌(MDA-MB-231)細胞自噬和細胞凋亡之機制探討

為了解決騰達行的問題，作者張嘉婷 這樣論述：

目錄天然植物對胃癌與乳癌死亡機制探討第一部分卡瓦胡椒素B誘導人類胃腺癌細胞自噬之機制探討摘要 2Abstract 4第一章 前言 5第二章 文獻探討 7ㄧ、胃癌(Gastric cancer) 8二、卡瓦(Kava) 11三、活性氧化物(Reactive oxygen species，ROS) 15四、自噬(Autophagy) 18五、細胞週期與癌症 24第三章 實驗試劑、材料與儀器 25ㄧ、實驗試劑 26二、實驗材料 32三、實驗儀器 33第四章 實驗方法 36ㄧ、人類胃癌細胞株、人類成纖維細胞株與大白鼠初代肝細胞之細胞培養 37二、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B)之配製 4

5三、倒立式位相差顯微鏡觀察人類胃癌細胞株與人類成纖維細胞株之細胞形態(Morphology) 45四、人類胃癌細胞株與人類成纖維細胞株之細胞存活率(Cell viability)測定 46五、大白鼠初代肝細胞之細胞存活率(Cell viability)測定 50六、人類胃腺癌細胞株之群落形成能力(Colony formation assay) 51七、人類胃腺癌細胞株之活性氧物質(Reactive oxygen species，ROS)產量測定法 52八、利用流式細胞分析儀(Flow cytometry )探討卡瓦胡椒素B(Flavokawain B)對人類胃腺癌細胞週期之影響 54九、利用

流式細胞分析儀(Flow cytometry)探討卡瓦胡椒素B(Flavokawain B)對人類胃腺癌細胞自噬(Autophagy)之影響 57十、利用?B啶橙染色法(Acridine orange staining)探討卡瓦胡椒素B(Flavokawain B)對人類胃腺癌細胞自噬(Autophagy)之影響 59十一、利用GFP-LC3 (Green Fluorescent Protein- Light Chain 3)質體轉染探討卡瓦胡椒素B (Flavokawain B)對人類胃腺癌細胞自噬(Autophagy)之影響 60十二、利用BAX過度表達(Overexpression)探討

卡瓦胡椒素B(Flavokawain B)對人類胃腺癌細胞凋亡(Apoptosis)與細胞自噬(Autophagy)之影響 62十三、TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick endlabeling) 檢測人類胃腺癌細胞凋亡 65十四、人類胃癌細胞總蛋白質萃取 67十五、人類胃癌細胞蛋白質定量 69十六、西方墨點法(Western blot) 71十七、質體(Plasmid)製備 80十八、質體抽取(plasmid DNA extraction) 83十九、RNA interference (shRNA)之細胞實驗 85二十、

無胸腺裸鼠(Nude mice)異種移植腫瘤(Xenograft Tumor )之動物實驗 92二十ㄧ、動物組織包埋與切片 95二十二、動物組織切片蘇木精-伊紅(Hematoxylin-eosin)染色法 95二十三、動物組織蛋白質萃取 96二十四、免疫組織化學染色(Immunochemistry Staining，IHC) 98二十五、無胸腺裸鼠(Nude mice) 異位移植腫瘤(Xenogr a f tTumor )之存活率實驗 102二十六、RNA interference (shRNA)之動物實驗 104二十七、實驗統計 105第五章 實驗結果與圖表 106ㄧ、卡瓦胡椒素B (Fla

vokawain B，FKB)誘導自噬，顯著促進人類胃腺癌細胞株AGS的死亡與抑制群落形成能力 107二、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)調節Beclin-1 / Bcl-2蛋白 比例，促進人類胃腺癌細胞株AGS誘導自噬 112三、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)透過自噬造成人類胃腺 癌細胞株AGS死亡，而不是透過凋亡 117四、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)促進活性氧化物的累積，造成人類胃腺癌細胞株AGS自噬性的死亡 124五、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)促進過氧化氫(Hydrogenperoxide，H2

O2)的累積與改變鈣離子的動態平衡，造成人類胃腺癌細胞株AGS的死亡 132六、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)造成人類胃癌細胞株NCI-N87與過度表達Bax蛋白的人類胃腺癌細胞株AGS，同時誘導自噬與凋亡136七、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)促進活性氧化物的累積，進而上調JNK信號路徑造成細胞週期停滯在G2/M期 142八、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)抑制HER-2/neu基因高表達的胃癌細胞株AGS與NCI-N87的HER-2/neu、PI3K/AKT和mTOR蛋白的表現 150九、卡瓦胡椒素B (Flavokawain

B，FKB)抑制人類胃腺癌細胞株AGS異種移植(Xenograft Model)無胸腺裸鼠(Nude mice)的腫瘤生長與延長無胸腺裸鼠(Nude mice)的存活率 152十、LC3基因沉默(shLC3)減弱卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)誘導人類胃腺癌細胞株AGS-shLC3自噬性死亡與回復無胸腺裸鼠(Nudemice)的腫瘤生長 158十ㄧ、卡瓦胡椒素B (Flavokawain B，FKB)減弱人類胃腺癌細胞株AGS-shLC3異種移植(Xenograft Model)無胸腺裸鼠(Nude mice)的腫瘤自噬蛋白表現 163第六章 討論 167第七章 結論 1

77第二部分香杉芝誘導人類三陰性乳腺癌(MDA-MB-231)細胞自噬和細胞凋亡之機制探討摘要 180Abstract 182第一章 前言 184第二章 文獻探討 187ㄧ、乳癌(Breast cancer) 188二、香杉芝(Antrodia salmonea) 190三、凋亡(Apoptosis) 192四、凋亡(Apoptosis)與自噬(Autophagy)之間的關係 193五、細胞發炎(Inflammation) 195第三章 實驗方法 196ㄧ、人類乳腺癌細胞株與人類正常乳腺上皮細胞株之細胞培養 197二、香杉芝(Antrodia salmonea)之配製 199三、倒立式位相差顯

微鏡觀察人類乳腺癌細胞株與人類正常乳腺上皮細胞株之細胞形態(Morphology) 199四、人類乳腺癌細胞株與人類正常乳腺上皮細胞株之細胞存活率(Cellviability)測定 200五、人類乳腺癌細胞株與人類正常乳腺上皮細胞株之活性氧物質(Reactive oxygen species，ROS)產量測定法 202六、利用流式細胞分析儀(Flow cytometry )探討香杉芝(Antrodiasalmonea)對人類三陰性乳腺癌細胞週期之影響 204七、利用?B啶橙染色法(Acridine orange staining)探討香杉芝 (Antrodiasalmonea)對人類三陰性乳腺

癌細胞自噬之影響 205八、利用流式細胞分析儀(Flow cytometry)探討香杉芝(Antrodiasalmonea)對人類三陰性乳腺癌細胞粒腺體膜電位 (Mitochondrialmembrane potential)之影響 207九、利用流式細胞分析儀(Flow cytometry)探討香杉芝(Antrodiasalmonea)對人類三陰性乳腺癌細胞凋亡之影響 209十、利用GFP-LC3 (Green Fluorescent Protein- Light Chain 3)質體轉染探討香杉芝(Antrodia salmonea)對人類三陰性乳腺癌細胞自噬(Autophagy)之影響

211十ㄧ、TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick endlabeling) 檢測人類三陰性乳腺癌細胞凋亡 212十二、人類三陰性乳腺癌細胞總蛋白質萃取 213十三、人類三陰性乳腺癌細胞蛋白質定量 213十四、西方墨點法(Western blot) 213十五、無胸腺裸鼠(Nude mice)異位移植腫瘤(Xenograft Tumor)之動物實驗 214十六、動物組織包埋與切片 217十七、動物組織蛋白質萃取 217十八、免疫組織化學染色(Immunochemistry Staining，IHC) 217十九、動物組織凋亡

分析(Tissue TUNNEL assay) 218二十、實驗統計 221第四章 實驗結果與圖表 222ㄧ、香杉芝(Antrodia salmonea)顯著的抑制人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的存活率與造成細胞形態的改變 223二、香杉芝(Antrodia salmonea)誘導人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231產生活性氧化物(Reactive oxygen species，ROS)225三、香杉芝(Antrodia salmonea) 造成人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231粒腺體膜電位 (Mitochondrial membrane potential △Ψm）

流失 227四、香杉芝(Antrodia salmonea) 促進活性氧化物(Reactive oxygenspecies，ROS)的累積，造成人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的死亡 228五、香杉芝(Antrodia salmonea)促進活性氧化物(Reactive oxygenspecies，ROS)的累積，造成人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的G2/M期細胞週期停滯(Cell cycle arrest) 229六、香杉芝(Antrodia salmonea)促進活性氧化物(Reactive oxygenspecies，ROS)的累積，造成G2/M期的細胞週期停滯(C

ell cycle arrest)和降低環氧合??-2 (COX-2)的活性表現 231七、香杉芝(Antrodia salmonea)促進活性氧化物(Reactive oxygenspecies，ROS)的累積，造成人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的DNA損傷(DNA damage) 234八、香杉芝(Antrodia salmonea)誘發人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的DNA片段化(DNA Fragmentation) 236九、香杉芝(Antrodia salmonea)活化粒線體(Mitochondrial)和死亡受體(Death-receptor)路徑誘導人類

三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231晚期細胞凋亡 239十、香杉芝(Antrodia salmonea)促進人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231自噬相關蛋白(Autophagy Related Protein)的表現 243十一、香杉芝(Antrodia salmonea) 促進人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的GFP-LC3轉換 246十二、香杉芝(Antrodia salmonea)誘導人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231形成酸性囊狀胞器（Acidic vesicular organelles, AVOs）造成自噬性細胞死亡 248十三、香杉芝(Antrodia s

almonea)誘發超氧自由基(superoxide anion，·O2-)與過氧化氫(Hydrogen peroxide，H2O2)的生成，促進人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231自噬和細胞凋亡 252十四、香杉芝(Antrodia salmonea)調節人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的Beclin-1/Bcl-2和Bax/Bcl-2蛋白比例，促進細胞自噬和細胞凋亡 256十五、香杉芝(Antrodia salmonea)促進自噬與凋亡的共同合作，造成人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的死亡 259十六、香杉芝(Antrodia salmonea)抑制人類三陰性乳腺

癌細胞株MDA-MB-231異種移植(Xenograft Model)無胸腺裸鼠(Nude mice)的腫瘤生長 262十七、香杉芝(Antrodia salmonea)降低人類三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231異種移植(Xenograft Model)無胸腺裸鼠(Nude mice)的腫瘤重量 264十八、香杉芝(Antrodia salmonea)誘發人類三陰性乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的原位凋亡(Situ apoptosis) 266十九、香杉芝(Antrodia salmonea)誘導人類三陰性乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的凋亡(Apoptosis)、自噬(Autophagy)和G2/M期的細胞

週期停滯，經由免疫組織化學染色分析 268二十、香杉芝(Antrodia salmonea)誘導人類三陰性乳腺癌裸鼠皮下移植瘤的凋亡(Apoptosis)、自噬(Autophagy)和G2/M期的細胞週期停滯，經由西方墨點法(Western blot)分析 270二十ㄧ、香杉芝(Antrodia salmonea)抑制人類三陰性乳腺癌螢光素??細胞株MDA-MB-231-Lucifrein異種移植(Xenograft Model)無胸腺裸鼠(Nude mice)的腫瘤生長 272第五章 討論 274第六章 結論 282參考文獻 284表目錄天然植物對胃癌與乳癌死亡機制探討第一部分卡瓦胡椒素B誘

導人類胃腺癌細胞自噬之機制探討表ㄧ 實驗試劑 26表二 實驗材料 32表三 實驗儀器 33表四 培養人類胃癌細胞株的RPMI 1640培養液之配方 37表五 培養人類胃癌細胞株的IMDM培養液之配方 38表六 培養人類成纖維細胞株的DMEM/HG培養液之配方 39表七 培養大白鼠初代肝細胞的RPMI 1640培養液之配方 40表八 1X磷酸鹽緩衝液(1X Phosphate buffered saline，1X PBS)之配方 41表九 Propidium iodide (PI)染劑之配方 55表十 In Situ Cell Death Detection Kit 65表十一 Lysis bu

ffer製備之配方 67表十二 BSA標準品配製 70表十三 SDS-PAGE製備之配方 72表十四 6 X Protein loading dye製備之配方 73表十五 5X Electrode buffer製備之配方 73表十六 1X Transfer buffer製備之配方 74表十七 Stripping buffer製備之配方 75表十八 一級抗體名稱與貨號 75表十九 二級抗體 77表二十 FavorPrepTM Plasmid DNA Extraction Maxi Kit 83表二十一 jetPEIR Transfection Reagent 86表二十二 shRNA質體 87表

二十三 EnVisionTM FLEX Mini Kit (Dako) 98第二部分香杉芝誘導人類三陰性乳腺癌(MDA-MB-231)細胞自噬和細胞凋亡之機制探討表二十四 細胞凋亡與自噬性細胞死亡之間的特性關係 193表二十五 DMEM/F12培養液之配方 197表二十六 FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit之內容物 209圖目錄天然植物對胃癌與乳癌死亡機制探討第一部分卡瓦胡椒素B誘導人類胃腺癌細胞自噬之機制探討Fig. 1 FKB mediates growth inhibition of gastric carcinoma cells through

induction of autophagy. 111Fig. 2 FKB enhances autophagy as a death mechanism in human gastriccancer (AGS) cells. 116Fig. 3 FKB induces cell death via autophagic pathways, not apoptoticpathways, in AGS cells. 124Fig. 4 FKB triggers ROS-mediated autophagy in AGS cells. 131Fig. 5 Effects of ROS modula

tors on FKB-induced AGS cell death. 135Fig. 6 Bax transfection promotes both apoptosis and autophagy inFKB-treated AGS cells. 141Fig. 7 FKB induces G2/M arrest through ROS-JNK signaling pathways inAGS cells. 149Fig. 8 FKB inhibits phosphorylation of HER-2/neu, PI3K/AKT andmTOR in HER-2/neu-expressin

g gastric cancer (AGS and NCI-N87)cells. 151Fig. 9 In vivo inhibition of AGS-xenografted tumors in nude mice byFKB treatment. 157Fig. 10 In vitro and in vivo effects of LC3 silencing on FKB-mediatedautophagy. 162Fig. 11 Western blot and histochemical analyses of autophagy in AGSshLC3-xenografted tum

ors. 166第二部分香杉芝誘導人類三陰性乳腺癌(MDA-MB-231)細胞自噬和細胞凋亡之機制探討Fig. 1 AS inhibits viability of human breast cancer cells. 224Fig. 2 AS induces intracellular ROS generation and mitochondrialdysfunction in MDA-MB-231 cells. 226Fig. 3 AS induces intracellular ROS generation and mitochondrialdysfunction in MDA-MB-2

31 cells. 227Fig. 4 AS induces intracellular ROS generation and mitochondrialdysfunction in MDA-MB-231 cells. 228Fig. 5 AS induces G2/M arrest in MDA-MB-231 cells. 230Fig. 6 The effects of AS on cell-cycle regulatory proteins and COX-2expression in MDA-MB-231 cells. 233Fig. 7 The effects of NAC on A

S-induced PARP cleavage inMDA-MB-231 cells. 235Fig. 8 AS triggers apoptotic DNA fragmentation in MDA-MB-231 cells.238Fig. 9 AS-induced late apoptosis is mediated through activation ofmitochondrial and death-receptor pathways. 242F i g . 10 AS t r igger s au tophag y s ignal i n g mo lecu les inMDA-M

B-231 cells. 245Fig. 11 AS promote conversion of GFP-LC3 in MDA-MB-231 cells.247Fig. 12 AS induces acidic vesicular organelle (AVOs) formation inMDA-MB-231 cells. 251Fig.13 AS triggers superoxide radical production and activates autophagyand apoptosis in MDA-MB-231 cells. 255Fig. 14 AS increases the

ratio of Beclin-1/Bcl-2 and Bax/Bcl-2 inMDA-MB-231 cells. 258Fig. 15 Interaction between AS-induced apoptosis and autophagy ofMDA-MB-231 cells. 261Fig. 16 Time-course effects of AS on MDA-MB-231 xenograft growth innude mice. 263Fig. 17 In vivo inhibition of MDA-MB-231 xenograft tumors by AStreatmen

t. 265Fig. 18 In situ apoptosis using TUNEL analysis in MDA-MB-231xenografted tumors. 267Fig. 19 Immunohistochemical analysis for caspase-3, LC3B, and cyclinB1 in MDA-MB-231 xenografted tumors. 269Fig. 20 AS inhibits MDA-MB-231 xenograft growth in nude micethrough induction of apoptosis- and autopha

gy-related proteins byWestern blotting. 271Fig. 21 AS treatment suppressed tumor growth in livingMDA-MB-231-luciferase cells injected nude mice.